大孔明胶微载体的制备.pdfVIP

　　　　　华　东　理　工　大　学　学　报 V o l. 23 N o. 4 ·4 12 · 　　　　　Jou rna l o f Ea st Ch ina U n iver sity o f Science and T echno logy 199708 大孔明胶微载体的制备+ 张孝兵 　张元兴　李雨田 (华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237) 　　提要: 以明胶为原料, 用悬浮成球、甲苯制孔的方法制备大孔明胶微载体。考察了 表面活性剂及其配比、油水比、明胶浓度、制备方式和表面修饰等对载体性能的影响, 优化了制备大孔明胶微载体的条件, 制得了直径为 100～ 300m , 孔径为 10～ 30m 的大孔明胶微载体。 关键词: 明胶; 微载体; 大孔微载体; 细胞培养;V ero 细胞 中图分类号: Q 952; TQ 43 1. 3 　　在大规模细胞培养中, 一般采用实心微载体作为培养介质。但实心载体比表面积较小, 于 [ 1 ] 是人们设想利用微珠内部来固定细胞。这项工作是从应用海藻酸钠系统开始的 , 到 目前为 止, 能最大限度地扩大表面积的是具有完全连通沟回的大孔微载体。这一方法首先在 1985 年 ( ) [2, 3 ] 由V erax 公司开创 V erax 系列多孔加重胶原微载体 , 接着有了P ercell 和 Siran 系统 。 [4 ] [ 5 ] 1986 年, 等 首次报道了大孔明胶微载体的制备及在细胞培养中的应用。 等 透 N ilsson D ean 露了V erax 加重微载体的制备方法, 这种微载体是由研磨过的胶原经冷冻干燥制得的。In fo r 大孔微载体是把 2. 5～ 5 的明胶溶液缓慢加入氨基葡聚糖溶液, 形成共沉淀制 m at r ix g L [ 6 ] [7 ] 得 。文献中报道的另一种方法是CaCO 3 制孔法 。 以上四种制备方法中, 中间两种的成球方法是通过滴入液氮冷冻成球, 设备要求高, 操作 比较困难。 微载体由胶原制成, 不能高温灭菌, 限制了这种方法的应用。通过低温成球再 V erax 冷冻干燥制孔的方法成本较高, 不太实用。 和 微载体用低浓度的胶原或明 V erax In fo rm at r ix 胶制得, 强度很低, 不宜高温灭菌, 一般采用 射线灭菌, 这在国内比较困难。 制孔法操