甘蓝夜蛾细胞色素P450CYP4M CYP6AB基因的克隆 表达的研究.pdf

摘要 于两 斐 P450或CYP450，简称P450)是一种广泛存在于细菌、 细胞色素P450(cytochrome 真菌、植物和动物体内的氧化酶系，由数量众多、功能复杂的一类血红蛋白酶组成。 在昆虫中，P450分布在昆虫的各个组织器官中，参与昆虫生长、发育、繁殖等重要的 生理活动，例如昆虫体内蜕皮激素与保幼激素等内源化合物的合成降解。它们对异生 物质的代谢作用导致了昆虫对杀虫剂的抗药性和对植物毒素的耐受性。P450酶通过 NADPH获得电子起末端氧化的作用，由P450催化的反应不仅包括氧原子的转移，同时P450 酶还具有氧化酶、还原酶、异构酶及脱氢酶的活性。分离昆虫P450基因并研究其特征是明 确P450如何参与虫体内重要的代谢过程的第一步，研究在很大程度上发现了昆虫抗药性形 成的机理，以及使用杀虫剂对昆虫生物学和生理学的影响。 本研究针对昆虫P450基因在昆虫体内不同时期不同组织的存在着差异性，确定了在其 活性较高的五龄幼虫期提取mRNA，进一步通过RT-PCR、RACE等技术克隆了甘蓝夜蛾P450 CyP删以及CYP6AB基因全长序列。 个氨基酸的多肽，分子量约为60．9kDa，等电点为8．65。基因的cDNA序列已经登录Ge