黑胸大蠊生物学特性和免疫调节作用分析.pdfVIP

摘 要 蜚蠊在地球上生存了3．5亿年，千百年来一直被人们视为害虫而 被剿杀，但是蜚蠊作为药用，在我国历代重要医药典籍中早有记载， 目前的研究发现，蜚蠊提取物具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤、治疗心血 管疾病、促进创伤愈合等作用。我们以长江流域各地区的优势蠊种黑 胸大蠊为材料，从其生长发育的观察、室内饲养、生理生化特点、药 用效果等方面进行了初步研究，目的在于探讨其生物学特性、发掘潜 在药用价值等，为黑胸大蠊的基础研究和药用价值的开发提供依据。 方法 1．观察黑胸大蠊生长发育的全过程，探讨其室内饲养方法。 2．运用生物化学和高效液相色谱技术对黑胸大蠊不同发育阶段 蛋白成分和氨基酸成分进行比较分析。 3．运用MTT比色法检测黑胸大蠊不同发育阶段提取物在体外对 淋巴细胞增殖的影响。 4．利用黑胸大蠊雄虫免疫兔血清对美洲大蠊若虫cDNA文库进行 免疫筛选和生物信息学分析。 结果与结论 1．通过对黑胸大蠊孵化、蜕皮、羽化、生殖产卵等生理过程的全 面观察，了解到了其在室内自然条件下的生物学特性、生活及行为习 性，探索了其不同发育时期对温度、湿度、饮食等的要求，建立了室 内人工饲养黑胸大蠊的方法。 2．生化分析结果显示：卵蛋白种类明显少于若虫与成虫；若虫的 蛋白种类及含量与成虫蛋白相近，不同龄期若虫的蛋白种类基本相 同，但主带的数量及位置有所在不同。雌、雄成虫间蛋白种类也有一 定差异。此外，采用高效液相色谱技术对黑胸大蠊各发育阶段的氨基 酸成分与含量进行了比较分析，结果表明若虫期氨基酸含量最高，雌 T 虫次之，卵含量最低。 3．首次采用MTT比色法观察了黑胸大蠊提取物免疫调节的药用 效果，证明若虫与雌虫提取物在一定剂量时对离体淋巴细胞有刺激作 用，能促进淋巴增殖，显示其具有潜在的免疫调节作用。 03基因编码的 01一Parcxpwmx06，利用生物信息学技术对Parcxpwmw 蛋白质进行分析，获悉了该蛋白的理化性质，二、三级结构及功能位 点等生物学信息，该蛋白与其它生物电子转移黄素蛋白的同源性较 高。经综合分析，推测该蛋白为受磷酸化激活调控的与信号传导和电 子传递有关的跨膜蛋白。 本实验从黑胸大蠊生长发育、人工饲养、生理生化特性等基础研 究到黑胸大蠊基因水平的研究，并初步探讨黑胸大蠊提取物免疫调节 的药用价值，为黑胸大蠊药用成分的分析鉴定及其开发应用提供了重 要的理论与实验依据。 关键词：黑胸大蠊，生长发育，免疫调节，文库筛选 木本研究受教育部“985行动计划”学科建设子项目 与湖南省“十五”重点学科建设项目经费联合资助 ABSTRACT objective The insect beeninexistenceintheworldfor Blatta(cockroach)has 350million itiS asavermin．theinsectbeen years．Asregarded has to forthousandsof subjected suppression years．However,theapplication ofcockroachasamedicineisrecordedina of numberinfluential of showthattheextractof pharmacopoeiapastdynasties．Studies Ameficancockroach exea