蛋白质与羟磷灰石表面的相互作用机理研究.pdf

摘 要 摘要 随着生物、医学、材料科学的发展，蛋白质与无机材料表面的相互作用成为 很多领域的研究热点。羟基磷灰石(HAP)是哺乳动物骨骼和牙齿的主要无机成 分，它具有很好的生物兼容性和特殊的表面性能，因此被认为是一种极具发展前 景的生物医用材料。本论文主要采用分子动力学模拟与量子化学计算相结合的方 法，从原子尺度系统地研究了蛋白质(主要是骨形态发生蛋白BMP一2和BMP．7) 在HAP表面的吸附一脱附行为，探讨了蛋白质在HAP表面的吸附机理，并对不 同蛋白质的动力学行为进行了比较分析。研究结果表明，通过表面修饰等微观尺 度的调节，有可能达到有目的地调控蛋白质在生物医学材料表面的行为。 论文主要由以下六个部分组成： 第一章，论述了本论文的研究背景与意义，并对本论文研究工作的国内外研 究现状作了综述。 第二章，介绍了本论文所采用的研究方法，包括分子动力学模拟和量子化学 计算方法。 第三章，从原子尺度上揭示了蛋白质BMP一2在HAP表面上的吸附．脱附机 理。研究发现，BMP一2与HAP(001)晶面的相互作用存在三种吸附基团，分别 为一OH，-NH2和-COO-。作为活性基团，它们往往与强吸电子基团(例如 -42=0)毗邻。根据蛋白质与HAP晶体相互作用面的不同，可能有一种或几种吸 附基团同时起作用。至于其作用原理，库仑力是一COO-与HAP相互作用的主 要作用力，但是对于不带净电荷的吸附基团(例如一OH和一NH2)而言，水桥 氢键更为重要。量子化学的计算结果证实这种水桥氢键是存在的。 第四章，研究了不同取向的BMP-2在HAP表面的吸附一脱附行为。结果表 明，蛋白质的取向对其与HAP表面的相互作用有着显著的影响。不同取向的 BMP-2在HAP表面的吸附基团的种类、数量、相互作用强度以及吸附时间都各 不相同。并且，不同取向的吸附蛋白质构象变化显著，这很有可能导致蛋白质在 摘 要 生物材料表面活性的变化。值得注意的是，在吸附最强的体系I中，BMP．2的 构象变化并不是最大的。 第五章，研究了HAP不同的表面构造对蛋白质BMP．7吸附．脱附行为的影 响。结果表明，相互作用能曲线可以为研究BMP．7动力学行为提供丰富的信息。 能量曲线不仅可以半定量的体现各个体系中相互作用强度的不同，而且可以定性 地说明不同体系中吸附基团的种类、数量以及吸附时间的差异。BMP．7与HAP 之间强烈的相互作用可以引起蛋白质结构的变化。在本章所研究的六个体系中， 蛋白质在100+a体系中的构型变化最大。在所有的这六个体系中，只有两类基团 进一步的量子化学计算表明，在蛋白质BMP．7吸附到HAP表面的过程中，发生 了电子转移现象。 第六章，对不同蛋白质在HAP表面的吸附．脱附行为进行了系统的比较。主 要选取了四种在生物体内参与调控HAP矿化与生长的蛋白质(BMP．2、BMP．7、 LRAP和FN—IIIlo)。结果表明，尽管不同的蛋白质各有其与生物材料表面相互 作用的位点与基团，但是Asp、Glu、Lys和Arg这四种氨基酸残基在各种蛋白质 中普遍被吸附到HAP表面，所以今后在讨论蛋白质与HAP之间相互作用的时 候，这四种残基应该着重加以关注。当蛋白质以不同的取向与HAP表面接触时， 其具体的动力学行为各不相同，但是每一种蛋白质都会有其特定的优势作用取 向。由于蛋白质与HAP表面的相互作用，蛋白质的构象往往会发生变化。相互 作用越强，蛋白质构象的变化往往也越明显，从而有可能导致蛋白质生物活性的 变化，应该予以特别注意。 关键词：蛋白质、骨形态发生蛋白、羟基磷灰石、吸附．脱附动力学、相互作用 机理、分子动力学模拟、量子化学计算 摘 要 Abstract Withthe ofmedicinalscience，materialscienceand development biotechnology, the behaviorsof onto have adsorption