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copc性的光研究
摘 要
元素铜是从人类到细菌所有生物体得以生存的必须微量元素。由于
铜离子特有的化学性质(氧化态cu2+还原态cu+)使的铜离子可以在生物
体生长发育中作为氧还蛋白辅因子。铜离子参与的反应也产生高活性氧
(Ros)包括羟基游离基。它能够使细胞脂膜蛋白过氧化、切割核酸分子而
损坏细胞。高度毒性的营养元素铜在细胞的吸收及细胞内的定位是一个
准确协调的过程。铜的体内平衡是由多个蛋白协调作用以确保将其运输
到特定的细胞器或靶蛋白,此过程中分子伴侣蛋白扮有重要角色。
两个相距约为30A
CopC在溶液中呈现由9股B折叠围成的桶状结构。
的铜(I)、铜(11)结合部位位于桶状结构的两端。
CopC是否具有分子伴侣的生物学功能?是否只是专一性的结合铜
离子?与铜结合有多强?以及疏水性通道是否具有生物功1fl…y,?有关这些
问题均未见文献报道。为了研究解决上述问题,我们做了如下工作:
1利用分子生物学法、离子交换法表达纯化了大量的纯度较高的
apoCopC,并经过聚丙烯酰胺电泳、液相色谱,质谱,紫外光谱加以鉴
定。
子的相互作用。结果表明apoCopC与铜(II)高亲和性结合,荧光光谱显示
Ag(1)也存在一定的结合。从热力学数据得知,CopC高亲和性、一定程
度上专一性结合铜(I)、铜(II),生物体内可能具有铜调控功能。
3按照蛋白质变性的两态机理计算了CopC的结构稳定化能。发现
1.6A。
算了cull_CopC中Cu2+与色氨酸残基问的距离r=l
性质。结果显示apoCopC可以与一个或多个小分子结合。其条件结合常
数大于104mol/L。
关键词CopC;分子生物学;光谱研究;超分子:金属离子
Abstract
ABSTRAT
for
isanessentialtraceelement survivalall
Copper required by
bacterialcellsto ions
from humans.Copperundergounique
organisms
duetotheir to distinctredox oxidized
chemistry abilityadopt states,either
inthereduced serveas
【Cu(II)]or state【cu(I)】,andthey importantcatalytic
inredox for that outfundamental
cofactors chemistryproteinscarry
functionsthatare for and
growth
biological required
a whenallowedtoaccumulate
is isalso
essential,it cytotoxin
copper potent
in ofcellularneeds.Cuis inreactionsthatresul
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