dna-三苯甲类染料体系的rls的研究与应用.pdfVIP

摘要 本论文在查阅大量文献的基础上，根据实验室的实验条件，选 择荧光共振光散射光谱法研究脱氧核糖核酸(DNA)与碱性三苯甲 烷类有机染料之间的相互作用前后的荧光共振光散射光谱(RLS) 特征，根据RLS信号的改变值与DNA的浓度呈正比的特点，建立 了四种测定纳克级DNA的新方法。这些方法具有快速、灵敏等特 分析，结果令人满意。 本论文共分为四章。 第一章研究了碱性三苯甲烷类有机染料灿烂绿(BG)与DNA 在弱酸性条件下的RLS特征，考察了影响因素和最佳反应条件， 研究表明，灿烂绿在三羟甲基氨基甲烷．盐酸(Tris．HCI)缓冲溶液 中，均只有较弱的共振光散射信号。在p}仁6．35的Tris．HCl缓冲溶 液中，加入DNA以后，在332nm处的共振光散射信号明显增强， 且共振光散射强度增加值与加入的DNA的浓度呈良好的线性关 系。据此建立了一种测定DNA的新方法，线性范围为0．】3～ 的测定结果令人满意。 第二章研究了碱性三苯甲烷类有机染料维多利亚蓝B(VB。B) 与DNA在弱碱性条件下的RLS特征，考察了体系的影响因素和最 佳反应条件，建立了一种测定DNA的新方法。研究表明，在DH=9．8l 的Tris．HCl缓冲溶液中，维多利亚蓝B与DNA相互作用使荧光共 振光散射信号在355nm处增强，其信号增强值与加入的DNA的浓 度呈良好的线性关系，线性范围为0．11～3．00 mg／L，相关系数为 o．9978，检出限为21．5H班，用于fsDNA的测定结果令人满意。 第三章研究了利用碱性三苯甲烷类有机染料甲基紫6B Tris．HCl缓冲溶液中的共振光散射特征，并考察了影响因素，建立 了一种测定fsDNA和ctDNA的新方法。方法的线性范围分别为0～ l-00 的测定结果令人满意。 第四章研究了利用碱性三苯甲烷类有机染料新品红(NM)定 冲溶液中，新品红与DNA分子作用后共振光散射在314nm处增强， 其强度增加值与DNA的浓度呈线性关系，据此，建赢了一种测定 DNA的共振光散射法。该方法线性范围分别为0．12．6．00 mg／L， pg·L～、21．8“g-L1。，用于DNA合成样品的测定获得了满意的结果。 同时，对该反应机理进行了探讨，并用紫外．可见光谱求出了其形 成常数。 关键词：脱氧核糖核酸，共振光散射光谱，灿烂绿，维多利亚 蓝B，甲基紫6B，新品红，三苯甲烷类染料 ADstract： The Resonance of characteristics light—scattering(I也S)spectra interaction of and acid TrjphenlmethaneDyes Systemdeoxyribonucleic been onalot the studied，basedofdocumentsand (DNA)have conditionsofthe new determinationmethodsofDNA laboratory．Four been have establishedto thevariation RLS