半滑舌鳎(Cyoglossus semilaevis)三倍体诱导和鲆鲽鱼类微卫星通用性研究.pdf

半滑舌鳎(Cynoglossus册行甜沈1，矽三倍体诱导和鲆鲽鱼类微卫星通用性研究 半滑舌鳎(Cynoglossus 卫星通用性研究 摘要 semilaevis)是我国一种重要的经济鱼类，它具有肉 半滑舌鳎(Cynoglossus 味鲜美、富含营养、生长迅速等优点。很多相关研究表明，多倍体鱼特别是三倍 体鱼LL--倍体具有更出色的的生长和繁殖性状，其正在成为鱼类育种、鱼类性状 改良等方面研究的目标。本文以半滑舌鳎为研究对象，进行了冷休克诱导半滑舌 鳎三倍体的研究，筛选了最佳诱导条件。此外，还利用本实验室的圆斑星鲽微卫 星引物在近缘物种中进行了通用性扩增，并对高眼鲽和木叶鲽的野生群体进行了 遗传多态性检测。主要结果如下： 1．将半滑舌鳎正常的精子与卵子受精，受精后在适当的时刻采用冷休克方法 抑制其第二极体排出的方法诱导了半滑舌鳎三倍体，并探讨了三倍体诱导的最佳 条件：在23*(2的水温下，在受精后4-5min，将受精卵放在4C海水中进行冷休 克处理，持续时间为20min，三倍体诱导率为35％。采用流式细胞仪DNA相对 含量和染色体制片方法进行分析，证明其确实是三倍体。通过对三倍体染色体进 行分析，辨认其雌雄染色体型为ZWW／ZZZ，出现频率为1：1，没有发现ZZW型 雌鱼，暗示半滑舌鳎Z染色体和W染色体之间的交叉和互换受到严重抑制。 6对圆斑 2．本研究还利用本实验室通过富集文库．菌落原位杂交方法筛选的21 星鲽微卫星引物在3个近缘物种条斑星鲽、高眼鲽和木叶鲽中进行了通用性扩 增。在三个物种中具有扩增出特异条带的引物为137、95、90，具有多态性的引 物数目分别为82、35和26。研究表明，圆斑星鲽微卫星标记引物在星鲽属(条 斑星鲽)有较高的通用性，在鲽亚目其余属内(高眼鲽和木叶鲽)鱼类中通用性 相对较低，进而验证微卫星序列的保守性跟物种遗传距离的关系。 3．用高眼鲽的20对多态性引物和木叶鲽的18对多态性引物，分别对其黄海 地区的野生群体进行遗传多样性分析，在高眼鲽中每个位点发现的等位基因数目 为5．14个，平均等位基因数为9．5个，观测杂合度和期望杂合度范围分别为 (p0．002s)；在木叶鲽中每个位点发现的等位基因数目为6．14个，平均等位基因 半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)三倍体诱导和鲆鲽鱼类微卫星通用性研究 这些微卫星标记都具有较高的多态性及信息含量，适合进行各种遗传学分析。 关键词：半滑舌鳎；三倍体：冷休克：微卫星；通用性 lI 半滑舌鳎亿咖咖埘sPmf，口P1，矽三倍体诱导和鲆鲽鱼类微卫星通用性研究 sole Researchof half-smooth inducingtriploid tongue the SSR in cross-speciesstudy semilaevis)and (Cynogiossus flatfishes Abstract an economicfish Half-smooth semilaevis)isimportant tonguesole(C妒oglossus hasdelicioustastewith valueand fastin inchina,which