2型猪链球菌ZuA和Hlp重组蛋白的制备及其免疫学特性研究.pdfVIP

摘要 摘 要 suis，suis)是重要的人兽共患病病原体，可引起 猪链球菌(Streptococcus 人和猪患脑膜炎、关节炎、肺炎、败血症甚至急性死亡，给养猪业和从业人员健 康均带来巨大威胁。1998年和2005年，在我国江苏省和四川省分别暴发了suis 2感染人和猪的公共卫生事件，患者中出现国内外罕见的链球菌中毒性休克综合 征(STSS)症状，该疫情引起了公共卫生领域的高度重视。虽然疫苗的研制是控制 ＆suis感染的重要手段，但是目前尚未开发出用于预防＆suis感染的有效疫苗。 ABC转运蛋白在细菌适应外界环境变化中具有一系列不同的功能，为细菌 输入生存所必需的营养物质，输出有毒物质。ABC转运蛋白在一些病原菌的致 病过程中起到重要的作用，而且许多定位于细菌表面的ABC转运蛋白具有免疫 原性和免疫保护性。因此，ABC转运蛋白在疫苗开发中具有潜在的价值。锌是 细菌生长所必需的一种重要微量元素，锌的吸收对于细菌在外界环境和宿主体内 的生存、繁殖至关重要。在细菌中，锌ABC转运蛋白ZnuABC不仅参与锌的运 输，还在多种病原菌的致病过程中起到非常重要的作用。 2中国强毒株05ZYH33基因组中 本研究通过生物信息学分析，发现S．suis 存在ZnuABC编码基因，其中细胞表面锌离子结合蛋白znuA与多种细菌的锌锰 2中国强毒株05ZYH33基因 离子结合脂蛋白具有较高的序列同源性。以S．suis coli，原核表 组为模板，PCR扩增znuA基因并克隆到pET32a载体并转化到E 达出ZnuA，并利用His亲和层析获得较高纯度的重组蛋白。Westernblot分析和 2感染过程中表达 ELISA结果表明，ZnuA具有良好的免疫原性，是一种在S．suis 2菌体表面蛋白。动物实验 的蛋白。流式细胞术结果表明，ZmtA是一个suis 为一个预防S．suis感染的亚单位疫苗候选分子。此外，基于ZnuA重组蛋白，初 2感染的血清学检测方法。 步建立了S．suis 本课题组前期研究发现一个全局性毒力负调控因子CovR，CovR调控多个 毒力相关基因的表达，其中溶血素样蛋白基因坳的表达发生上调。本研究的第 转化E．coli 度的Hlp重组蛋白后，利用重组蛋白免疫新西兰兔，获得较高效价的抗血清。 究及S．suis疫苗的研究奠定了基础。 关键词：猪链球菌，ZnuA，Hlp，原核表达 Abstract Abstract all zoonotic associatedwith Streptococcussuis(S．suis)is pathogen a important wide ofinfectionsinswineand variety humans，includingmeningitis，arthritis， and andeven sudden threattothe pneumoniasepticemia death，posinggreat global andthehealth swine of with or industry