9例携带线粒体RNAAlaC5601T突变的Leber遗传性神经病变家系的相关研究.pdfVIP

—————————————————————塑塑坚塑主堂篁笙壅 9例携带线粒体tRN∥8C5601 T突变的Leber遗传性视神经病变 家系的相关研究 中文摘要 目的 1． 于全国各地收集遗传性视神经萎缩病变的家系，并建立临床资料和遗传学资料 数据库。 2．统计收集的家系与正常对照者中与Leber遗传性视神经病变(Leber’Shereditary optic G3460A、ND4G11778A、ND6 原发突变位点(NDl T14484C)的发病频率，绘 制中国LHON人群的线粒体基因突变频谱。 3．对未携带3个原发性突变位点的家系进行线粒体全基因组序列分析，筛选出与 LHON相关的一些mtDNA新突变，并分析其在LHON发病过程中的作用。 4．对收集到的携带线粒体tRNAAl8 因、环境因素等其他因素对中国LHON家系外显率和表现度的影响。 方法 1．通过全国各地的合作医院收集送检家系的临床和家系资料，采集家系成员的外 周静脉血样，并且绘制相应的遗传图谱，组建视神经萎缩家系收集的网络和资 料数据库。 2．检查家系成员的临床眼科表现：通过标准对数视力表检测视力，检查色觉，检 查视野，检查视觉诱发电位(VEP)，检查眼底。 3． 抽提采集血样的线粒体全基因组DNA，并以其为模板对先证者及家系其他成员 的NDl基因、ND4基因和ⅣD6基因的区域片段分别进行扩增、产物纯化，筛查 G1 4．接着使用24对有部分重叠的引物对家系先证者进行线粒体基因组全序列扩增纯 化和测序分析。 5． 行保守性分析。同时，对家系其他成员和104例正常对照血样进行扩增、测序并 分析。 4 结果： 1． 1 个原发突变位点的家系509+，其中携e带G1 G3460A突变的家系60个、携带T14484C突变的家系19个。 2．对收集到的家系进行线粒体全基因组序列分析，发现携带线粒体tRNAAla 携带ND4G1 1778A突变。 3．9个家系先证者尽管都具有相似的LHONI r台床表型，但其视力损伤程度从轻度到 G2。 4．C5601T突变位于tRNA川8 种系发生学进行分析，发现C5601T的保守系数为82．4％。 5．94家系携带的tRNAAl8C5601T和ArD4 (汉族人群)中不存在。 结论 G3460A、ND4G1 1．3个原发突变位点(NDl 1778A、ND6 T14484C)的发病频谱与 1 白种人相比表现差异，其中G1 T14484C突变所占比例较低，分别为4．7％和1．5％。 2．9个携带线粒体tRNAAl8 A18 G1 1778A突变的家系，而另外7个仅携带tRNAC5601T突变的家系外显率很 进LHON的外显率和表现度，同时也提示其他因素如线粒体单体型、核修饰基 因、环境因素等可能协同影nIj．ILHON的表型表达。 型可能与LHON的外显率和视力损害程度相关。 关键词：Leber遗传性视神经病变；线粒体DNA；突变；视力损害；tRNA The ofLeber’S Analysis Hereditary OpticNeuropathy with MitochondrialDNA