产生GABA酵菌资源多样性和分子系统学研究.pdfVIP

n■L DissertationforMaster of DegreeZhejiang Normal University Resoure andMolecular Diversity StudiesonYeastswhich Systematics ProduceGABA Candidate：XuXiaobo Supervisor：Prof．JiangDonghua Discipline：Botany of CollegeChemistryLifeScience， Normal ZhejiangUniversity,Jinhua321004，Zhejiang May,2010 P ‘- ● ThisResearchwasFundedthe or by maj sciencIanand of lan technologyPlanhe technologyZhej plan theNatural ScienceFoundationof Province Zhejiang (Grant ◆ -‘ 产生GABA酵母菌资源多样性和分子系统学研究 摘要 酵母菌是我国重要的微生物资源，在我国已有两千多年的使用历史。但是 关于酵母菌的分类鉴定，特别是属以下种的分类鉴定存在很多争议和混乱，这 对于酵母菌的研究和应用是很不利的。 丫．氨基丁酸(GABA)是广泛分布于动植物中的一种天然活性成分，具有 降血压、镇痛、改善脑机能、精神安定、促进长期记忆等多种生理功能。GABA 的研究开发已经成为新的热点，通过筛选优良、高产、安全的酵母菌等微生物 菌株，发酵生产富含GABA功能性食品配料，其产品具有成本低、含量高及可 安全用于食品的优点。本研究以能产生GABA的酵母菌为研究对象，从形态学、 分子生物学等方面探索了产生Q惦A酵母菌菌种的鉴别方法，以期为酵母菌菌 种鉴别和亲缘关系研究提供借鉴。具体结果如下： 1．从各种不同水果表皮和不同场所的自然环境中分离得到256株纯的酵母菌 株，筛选得到能产GABA的酵母菌株17株，另外索要和购买了2株参照菌株。 以这19株酵母菌株为研究对象，通过传统的形态学分类鉴定方法，依据《酵母 菌的特征与鉴定手册》，将19株酵母进行初步分类鉴定，结果如下：Y-5、Y-8、 cerevisiae)： Y-6、Y-13为红酵母(Rhodotorula (Rhodosporidium lactis)I uvarum)；Y-12为地生酵母 Y-3和V15为葡萄汁酵母(Saccharomyces telluris)。 (Saccharomyces 2．从27条ISSR引物中筛选得到lO条引物，共扩增出108条谱带，其中90．7 ％呈多态性。以ISSR．PCR扩增的产物图谱为依据，对供试的19个酵母菌株进 行聚类分析。在相似水平为0．69处，19个酵母菌株可以划分为5个群，第1群：