刺参(Aposichopus japonicus)在夏眠过程中生理代谢调控机制的研究.pdfVIP

刺参㈣一c^叩淞弼印fc淞)在夏眠过程中生理代谢调控机制的研究 刺参(4p锻斑厅印砸伽豇脚在夏眠过程中生理代谢 调控机制的研究 摘要 夏眠是刺参G妒Ds，砌印螂却D，2fc淞)在高温环境的一种休眠状态，本文研究了 在实验性夏眠条件下刺参组织代谢变化规律和调控因素以及基因表达的变化，主 要内容包括(1)温度变化对刺参代谢酶、消化酶、抗氧化能力的影响、(2)温度 变化对刺参生物胺含量的影响、(3)温度变化对信号转导通路的影响、(4)温度变 化对基因表达的影响。 1、研究了在温度变化下刺参组织代谢酶、肠道消化酶和体腔液抗氧化系统的变 化规律。结果表明，实验组体壁GDH和PK活力呈峰值变化，分别于8、10d时 达到最小值，10d后逐渐升高，至20d时GDH、PK活力分别低于和高于对照组 水平，并与温度呈明显的负、正相关性；呼吸树G．6．PDH、GDH和PK活性均 随温度升高而增大，ST实验组分别在10、8、6d达到最大值，LT实验组均在10d 达到最大值，温度稳定后G一6．PDH活性保持稳定，而GDH和PK活性一直降低。 温度变化对胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性影响显著，温度升高时淀粉酶和脂肪 酶活性降低，而胰蛋白酶活性先升高后降低。体腔液总抗氧化能力随温度变化呈 峰值变化，两个实验组分别在6、8d达到最大值；SOD活性随温度升高显著降 低于6d达到最小值并保持稳定；GSH／GSSG比值在温度升高时高于对照组，至 20d时低于对照组，但变化不显著。 2、研究了在实验性温度变化下刺参体腔液、体壁、呼吸树生物胺含量的变化。 体腔液NE、DA随温度呈峰值变化，两实验组分别在6、lOd达到最小值、最大 值，到20d时除LT实验组NE低于对照组外均与对照组无显著差异，5一HT含量 呈降低趋势，至20d时实验组与对照组相差显著；各实验组在实验时间内体壁 DA、5．HT和NE含量均呈峰值变化，分别于10d、6d时达到最大值、最小值， ； 刺参翻p∞“c^叩w弦删f)在夏眠过程中生理代谢调控机制的磺究 DA含量与温度呈显著的正相关蛙；呼吸树NE、pA、5．}{T随温度变化呈峰值 变化，分别在10d时达到最小值、最大值，并与温度呈负、正相关性，至20(1时NE 含量翌著低于对照组，ST实验组DA与对照组无差异而H实验组高于对照组； 5。}差T低于对照组并与温度呈负相关。 3、研究了在实验性温度变化下剌参体壁和呼吸树信号通路因子的变化。两实验 量均于6d时达到最小僮，并保持稳定，丽cGMp含量分别予8、10d时达到最 小傻，cAMP、cGMp含量在lO．20d内均逐渐升高，恢复至对照组水平；pKA活 力均予6d时达到最小值并保持稳定，pKG活力分别于8、lod时达到最小值， 1铽后ST实验组PKA、pKG活力恢复至对照组水平，而班实验组分潮低于和 高于对照组水平。两实验组呼吸树c触幢p分别在8、lOd达捌最大值，两eQ涯p 则在10d达到最大值，并且与温度呈正相关性；温度稳定后含量降低，至20d 时ST实验组c触艘恢复至对照组水平，嫒’实验组高于对照组，而cGMP则分 别低于和高于对照组。呼吸树PKA、pKG活力变化与体壁不阂，与温度呈正相 关性，两个实验组PKA分别在8、lOd达至§最大值，PKG则均在lOd达到最大 值；lO-20d内活力均降低，至2砸时两个实验组P圣渔分别恢复至对照组和高于 对照组水平，厮PKG则分别低于和高于对照组水平 4、应用SS薹{技术筛选了刺参在实验性夏眠条件下肠道差异表达基因，以正常生 长刺参提取的洲烈A为“drivef，夏眠中剜参提取的斛}斟A为“论s溆得到一 个容量约为5∞的阳性克隆文库，测序后得到309个有效EST序列，应用Blast2Go 软件分奉厅115个EST序列与Ge遭ank有较离的江配度∞LASTE．vaIue10一s)， 匹配率为37。2％。对筛选出的差异表达基因荧光定量PCR分析，结果证明大部 分基因在一定范围内对温度具有剂量。时间效应。 关键词： 蒯参；夏眠；生理代谢；信号转导；差异基因表达 刺参㈣ffc慨脚c埘)在夏眠过程中生理代谢调控机制的研究 onthe metaboKsmand Study physiological regulatio