双歧杆菌与嗜酸杆菌最适混合培养条件的研究与产品开发.pdfVIP

摘 要 论文题目： 双歧杆菌与嗜酸乳杆菌最适混合培养条件的研究 与产品开发 专 业： 生物化学与分子生物学 研 究 生： 赵 磊 指导教师： 秦翠丽 副教授 摘 要 双歧杆菌和嗜酸乳杆菌是一类重要的益生菌，具有保持肠道菌群平衡、增 强机体免疫力、防治胃肠道疾病等益生功能，因此，益生菌及其产品开发越来越 成为研究的热点，但由于绝大多数益生菌不耐氧、不耐酸、易失活，且不同菌株 之间还会出现拮抗现象，一定程度上限制了其开发应用与效能。为提高益生菌的 活菌数和适应能力，本研究以青春双歧杆菌和嗜酸乳杆菌为试验菌株，开展了以 下研究： 1．青春双歧杆菌与嗜酸乳杆菌单独培养最适培养条件的研究 (1) 碳源的优化 在不含碳源的 MRS 培养基中分别加入 2% 的菊粉、蔗 糖、葡萄糖、乳糖和淀粉制成培养基。将两菌分别按 1% 的量接入制备的培养 基中培养。结果，两菌都能利用菊粉、蔗糖、乳糖、葡萄糖，不能利用淀粉；在 含菊粉的培养基中生长较好，而在含蔗糖、乳糖的培养基中生长存在延滞期。 (2) 氮源的优化 采用四因素三水平正交试验设计，在不含氮源的 MRS 培 养基中，分别按 0.3% 、0.6% 、0.9% 的量加入酵母膏 (A) ，蛋白胨 (B) ，大豆蛋 白胨 (C) 和牛肉膏 (D)制成培养基。将两菌分别按 1% 的量接入制备的培养基 中培养。结果，影响因素呈现ACBD 。 (3) 益生元的优化 在 MRS 培养基中分别加入 1% 的水苏糖、低聚果糖、 低聚异麦芽糖制成含益生元的培养基，将两菌分别按 1% 的量接入制备的培养 基中培养。结果，这3 种低聚糖对青春双岐杆菌生长影响显著，而对嗜酸乳杆菌 的影响不明显，尤其是低聚果糖对青春双岐杆菌生长的影响效果比水苏糖、低聚 异麦芽糖较显著。 2．青春双歧杆菌与嗜酸乳杆菌混合培养最适生长条件的研究 通过单因素试验和 RSA 响应面分析法优化了两菌混合培养条件，探讨了两 菌不同浓度配比、pH 值、低聚果糖的不同添加量对混合培养生长的影响。结 果，两菌浓度配比 1:1、pH 值 6.512、低聚果糖的添加量 1.499% 时，两菌在混 合培养体系中有良好的微生态关系。 I 摘要 3．青春双歧杆菌与嗜酸乳杆菌活菌体收集得率的研究 为确定两菌活菌体的最佳收集得率，采用离心时间、离心速率，做两因素三 水平正交试验，结果，在4 ℃、6000r/min 的条件下离心30min ，活菌得率最高， 为83.1%。 4. 青春双歧杆菌与嗜酸乳杆菌新产品的研制 将青春双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和益生元复配，采用不同方法制备合生元微胶 囊、硬胶囊以及液态制剂；并对所制产品进行耐胃酸试验、肠道崩解试验和人工 胃、肠液联合作用试验。结果，相同条件下，合生元微胶囊比合生元硬胶囊、合 生元液态制剂存活率高。合生元微胶囊经人工胃液消化 2h 后存活率可达 70.8% ；在人工肠液经 50min 降解充分，溶出率达到 96.7% ；经人工胃液、肠液 联合作用后存活率仍可达66.8% 。 关 键 词：青春双歧杆菌，嗜酸乳杆菌，响应面分析法，合生元，微胶囊 论文类型：应用基础研究 II