抗TNF-α和l-1β IgY抗体治疗豚鼠过敏性支气管哮喘的研究.pdfVIP

摘要 摘要 目的： 探讨抗TNF．0【和IL．1 BIgY抗体雾化吸入治疗过敏性支气管哮喘的作用机制。 方法： 1、应用卵清蛋白(OVA)雾化吸入法建立Hartley豚鼠过敏性支气管哮喘 模型。 2、雾化吸入抗TNF．0【和IL．1pIgY抗体及布地奈德混悬液。 3、随机分为五组：正常对照组(C组)；过敏性支气管哮喘组(M组)：0．1％ 抗TNF一伐和IL—lp IgY抗体治疗组(El组)；1．0％抗TNF．Q和IL．1BIgY抗体治 疗组(Z2组)；布地奈德混悬液治疗组(常规药物阳性治疗组)(Z，组)。 4、观察各组用药治疗前后1h的活动、进食、喷嚏、抓鼻、咳嗽、呼吸频 率和呼吸深度等一系列变化。 5、所有实验组豚鼠于末次治疗结束后第2、4、8、24小时等4个时问点处 死，取右肺做病理切片，经HE染色，观察肺组织病理变化。 6、所有实验组豚鼠于术次治疗结束后第2、4、8、24小时等4个时间点处 死，左肺行支气管肺泡生理盐水灌注，收集肺泡灌洗液(BALF)测定细胞因子 及IgE含量。 IL．10、IL．13、IL．16和TGF．p等细胞因子和IgE的含量。 8、应用SPSS 19．0统计软件进行统计分析，数据采用X+SD表示。对各组 不同时间之问先进行矛正态分布和方差齐性检验，若符合正态分布和方差齐性， ANOVA)，多重比较再采用LSD检验。若不 则采用单因素方差分析(one．way 符合正态分布和方差不齐性，则采用多重秩和检验，多重比较用Mann—Whiteney 法。相关性检验使用Pearson方法。取P0．05表示差异有显著性。进行统计学 分析。 摘要 结果： 1、应用卵清蛋白(OVA)雾化吸入法建立Hartley豚鼠过敏性支气管哮喘 模型成功。 2、动物行为学观察：模型组(M组)动物在雾化吸入致敏后表现比较兴奋， 烦躁不安，摩擦皮毛，抓鼻、喷嚏、咳嗽现象；0．1％抗TNF—a和IL一1pIgY抗体 治疗组(Zl组)、1．0％抗TNF．q和IL．113IgY抗体治疗组(Z2组)、布地奈德混 悬液(常规药物阳性治疗组)(Z3组)动物进食、饮水、活动在治疗后较M组 动物明显改善。 3、肺组织病理学检查： C组各时间点下的肺组织在光镜下可见气道壁和肺泡壁结构完整，毛细血管 密集，管腔通畅；肺泡腔内清洁透亮，肺泡上皮细胞排列有序：肺泡上皮与毛 细血管及其问质成份结构完整并构成完整的肺泡呼吸膜；各级支气管周围未见 炎性细胞浸润。 M组动物各时问点下的肺支气管、肺泡壁和肺泡腔结构不完整；毛细血管 发生扩张，白细胞明显增多；肺泡腔发生大面积破裂，腔内可见渗出液，包括 坏死的肺泡上皮细胞，并有白细胞浸润；支气管管壁平滑肌细胞肥大和增生， 基底膜显著增厚并玻璃样变；肺间质有淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性细胞浸 润。 Zl组和Z2组肺泡管和肺泡壁结构结构较完整；肺泡形态较M组规则，肺 泡腔内偶见少量炎症细胞游离于其中；肿泡毛细血管内炎性细胞较M组明显减 少；支气管粘膜有部分增厚现象，管壁平滑肌细胞较M组明显减少；支气管管 腔内及管腔旁仅可见少量炎性细胞浸润。 Z3组和M组比较肺泡结构破坏减少。Zl组、Z2组、Z3组之间相比较形态结 构未见明显的差别。 4、BALF细胞因子变化： 2h：M组各细胞因子含量高于C组(P0．05)，IL．1含量高于其他各组 摘要 IL．8、 4h：M组IL．1、IL．4、IL．6、IgE含量高于其他各治疗组(P0．05)： (PO．05)。 Z3组TNF．仅、TGFl3低于Zl、Z2组 组(PO．05)；Z2组TNF一0【、IgE含量显著低于Zl组(PO．05)。 IgE在Zl、Z2、Z3组含量高于C组(P0．05)。