抗CD3%2f抗CD20双特异性单链抗体构建、表达及生物学活性检测.pdf

中文摘要 抗CD3／抗CD20双特异性单链抗体的构建、表达 及生物学活性检测 (中文摘要) Tcell BiTEs(bispecific 单链抗体，它采用单链抗体技术，将两个不同抗体的重链及轻链可变区连接在一 条多肽链上，并作为活性蛋白在CH0细胞中进行分泌表达，其基本的形式是 T细胞及病变细胞表面的抗原分子结合，从而有效地激活静止的T细胞来达到杀伤 的新型工程抗体，它以CD20为靶标，具有靶向杀伤B细胞淋巴瘤的功能。 u 达，其表达量约为300g几培养上清。采用用Ni—NTA纯化系统进行对培养上清 进行亲和层析，得到了纯度较高、分子量为59，5KD的目的蛋白。活细胞间接免疫 Ramous细胞发生特异性结合，玫瑰花环实验显示该抗体在体外可诱导效应细胞聚 集在靶细胞周围。扫描电镜观察和非放射性细胞杀伤检测实验证明抗CD3／抗CD20 双特异性单链抗体可有效介导IL一2预激活的人外周血淋巴细胞杀伤8淋巴瘤细胞 u Ramou