植物蛋白sum化系统的构建与atmms21的sumo化检测.pdf

SouthChinaNormal University TheDissertationforMaster’s Degree Establishmentof plantsumoylationsystem andsu detectionofAtMMS21 moylation Liu Ming Supervisor：Prof．ChengweiYang Molecular and Biology Specialty： Biochemistry College： ofLifeScience College SubmittedDate： 262010 May 摘要 植物蛋白SUMO化系统的构建 与AtMMS21的SUMO化检测 专业：生物化学与分子生物学 姓名：刘明 导师：阳成伟教授 摘要 蛋白质翻译后修饰是真核生物基因转录翻译后行使生物学功能的重要一环， 如泛素化、磷酸化、乙酰化、甲基化、糖基化和SUMO化等，这种翻译后修饰可 以使细胞快速便捷地调控蛋白质的功能，灵敏地应对内外环境的变化。SUMO (small modifier)是近年来发现的在结构上类似于泛素的一类小分 ubiquitin．1ike 子蛋白质修饰物，SUMO化修饰具有广泛的功能，主要体现在被其修饰的底物 上。目前的研究表明，植物的SUMO化修饰在植物生长发育、激素信号转导、 抗病防御以及应对非生物胁迫等方面起重要作用。 间形成一个异肽键。其具体过程也与泛素化修饰十分相似，涉及多个酶的级联反 应：E1活化酶，E2结合酶以及E3连接酶，但二者反应途径中涉及到的酶完全不同。 本实验首先利用大肠杆菌表达系统成功将编码拟南芥SUMO化过程中的 达。结果表明： (1)采用O．1mM 电泳分析其可溶性，结果表明在此条件下表达的融合蛋白可溶。选择上清经过 过谷胱甘肽．琼脂糖树脂或NI-NTA亲和柱，再经超滤管进行超滤，得到了纯化 的拟南芥SUMO、E2结合酶及E3连接酶AtMMS2l蛋白。 摘要 和在大肠杆菌中表达的酵母SUMO 一个编码拟南芥SUMOE3连接酶的基因。 关键词：AtMMS21SUMO化原核表达拟南芥 n ABSTRACT PLANT ESTABLISHⅣ匝NTOF SUMOYLATIONSYSlEM AND 1 SUMOYLATIONDETECTIONOFATMM$2 and Liu Major：MolecularBiochemistry