不同形态精子的超微结构研究.pdfVIP

ChineseJo啪al v01．29No．62015 54 ofAndr0109y ·临床经验· 不同形态精子的超微结构研究+ 许振国1△ 杨文颖m6 赵峥辉1 吴银玲1 葛少钦l’3‘5” 1．河北大学医学部(保定071000)；2．保定市竞秀区医院； 3．河北大学生殖医学研究所；4．河北大学附属医院生殖医学科；5．河北省计划生育科学技术研究院 据报道，世界范围内约有15％～20％的育龄夫妇 3．实验材料与方法：(1)受试对象精液样本 不能生育，且近半个世纪以来，随着全球污染问题的 采集集于25～40周岁之间男性，无外伤及遗传性疾 日益严重，社会竞争压力的日趋增加，生活步伐节奏 病家族史，无性功能障碍病史，未发现有明显睾丸、 的不断加快，男性生殖健康正受到严重威胁，男性精 附睾及输精管异常。不明原因性不育患者8例，婚后 子数量几乎减少了一半，并且，还以每年2．1％的速度 2年以上未采取任何避孕措施且无生育史，并已排除 在减少。同时，畸形、劣质精子比例逐渐增多，精子 女方因素。生育力正常男性3例，为身体健康志愿 活力、穿透力、致孕率在不断下降，致使男性不育的 者，婚后1年，已成功自然受孕妇女的丈夫； (2) 比例正在逐年上升。精液分析在诊断男性不育及辅助 禁欲3～7d后，在室温25～30℃的实验室内，由供精者 生殖方面起到越来越重要的作用，精液分析主要包括 取精。待精液自动液化后，缓慢注入离心管中，以 了精子形态、精子活力和精子密度等。随着染色技术 650×鼻，离心10min，用吸管轻轻吸出精浆，沉淀精 的发展和畸形精子分类体系的形成，精子形态学检查 子用琼脂糖进行预包埋，再用戊二醛固定液固定1h 对不孕不育症诊断、生育能力预测以及公共健康研究 有重要意义，比精子密度、精液质量和运动性更能在 锇酸固定lh，洗涤脱水后，用Epon812环氧树脂包 受孕中起到预测作用…。 埋，在光镜下进行半薄定位，用甲苯胺蓝染色，超薄 近几年研究发现，不育男性精子不仅存在光镜 切片，铅铀双染，透射电镜下观察。 形态学异常和免疫动力学改变，而且精子的超微结构 4．观察指标：在透射电镜下主要观察不同形态 也发生了病理性改变。精液常规分析不能全面反映精 精子的质膜、顶体、细胞核、精子颈部、线粒体和微 子受精能力，而且已经不能满足日益发展的辅助生殖 管等病理性改变。 技术的需要。目前辅助生殖技术在治疗男性不育时尚 结 果 没有对电镜下不同形态精子的超微结构进行系统研 通过在电镜下对不同头部形态精子的超微结构 究，没有对光镜下不同头部形态精子通过其电镜下超 观察，我们发现与正常形态精子相比，锥形头、圆 微结构进行系统的质量评价。为全面评价精子受精能 头、长头、双头等异常头部形态精子均存在着不同程 力，电镜观察精子超微结构是必要的口】。本实验室通 度的超微结构缺陷。通过对不同头部形态精子进行超 过对不同头部形态精子超微结构进行研究，总结了不 微结构观察，我们发现与正常形态精子相比，锥形 同头部形态精子的超微结构特点，并依据其超微结构 头、圆头、双头等异常头部形态精子均存在着不同程 缺陷对精子进行质量评价。 度的超微结构缺陷。正常精子头部长宽比例适当，质 材料与方法 膜和顶体完整，细胞核无或有少量空泡，线粒体排列 1．试剂：琼脂糖，戊二醛，锇酸，Epon812树有序，微管整齐，9+2结构完整(图1)；锥形头精子 脂，甲苯胺蓝，醋酸铀，柠檬酸铅。