《农杆菌介导的华南型黄瓜遗传转化体系的初步研究》.pdfVIP

西 南 农 业 学 报 2014年27卷4期 1656 SouthwestChinaJournalofA culturalSciences V01．27 Nn4 文章编号：1001—4829(2014)04—1656一o5 农杆菌介导的华南型黄瓜遗传转化体系的初步研究 杨 宏 ，刘小俊 ，梁根云 ，房 超 ，刘独臣 ，蔡 鹏 ，李跃建 ’2 (1．I~Jtl省农业科学院园艺研究所 ，蔬菜种质与品种创新I~t)tl省重点实验室，四川成都 610066；2．农业部西南地区园艺作物生物 学与种质创制重点实验室，四川 成都 610066) 摘 要：以华南型黄瓜 ‘二早子’、‘白丝条’、川‘绿2号’近叶柄部子叶为外植体，对影响农杆菌介导的卡那霉素抗性遗传转化体 系的主要因素如基因型、不定芽诱导最佳激素配比、筛选压、农杆菌侵染时间、农杆菌侵染浓度、共培养温度等进行试验，建立一个 高效的黄瓜子叶遗传转化体系。结果表明，子叶分化再生能力 川‘绿2号 ‘二早子’ ‘白丝条’。1．5ms／L6-BA+O．1m L TDZ+0．5mg／LABA能较好地促进 二‘早子、‘白丝条子叶不定芽再生，而 “川绿2号”在含 1．5mg／L6-BA +0．5mg／LABA的MS 培养基就能达到最佳分化率。筛选压与外植体分化能力有关，分化能力强的基因型需要较高的kan筛选压。OD600=0．3，侵染60 min，共培养温度26℃时有利于子叶的遗传转化。本研究中，‘二早子’的遗传转化率达到 l5．46％，‘白丝条’的遗传转化率达到 10．2％ 。 关键词：华南型黄瓜；农杆菌；遗传转化；因素 中图分类号：$642．2 文献标识码 ：A EstablishmentofGeneticTransformationSystem by Agrobacterium tumefaciensofCucumber YANGHongr，LIUXiao-junr，LIANGGen—yun．一，FANGChaor，LIUDu—chen。一，CAIPcngr，LIYueqian ·‘ (1．HorticulutreInstituteofSichuanAcademyofA~culturalSciences，VegetableGemrplasmInnovationandValietyImprovementKeyLabo- ratoryofSiehuanProvince，SichuanChengdu610066，China；2．KeyLaboratoryofHorticulutralCropBiologyandGermplasm Enhancementin Southwest，MimstryofAgriculture，SichuanChengdu610066，China) Abstract：AtransformationsystemofcucumbercotyledonviaAgrobacteriumtumefacienswereestablishde bysutdyingfactomincludinggeno- type，inducingmediumwitlldifferenthormones ，screeningpressure，GV3101concentration，infectiontime，CO-cultivationtemperature，etc． Theresultsindicatde that，MS+1．5ms／L6一BA+0．1mg／LTDZ+0．5mg／LABAWClaggoodforadventitiousbudregenerationofe‘rzaozi’ nadb‘aisitiao’．Cotyldeondifferentiationability c‘huanlv2’ c‘rzaozi’ b‘aisitiao’，genotype ofhi曲 differentiationbailityrequired highKanscreeningpressure．GV3101concentrationofOD60o0．3，60min