经鼻给予不同浓度NGF对SOC1-93A小鼠内源性神经干细胞增殖作用影响与研究.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 殖作用影响的研究 前言…………………………………………………·………………··刖舌…………………………………………………‘………………一 88 材料与方法……………………………………………………………9 结果……………………………………………………………………2l 附图………………………………………………………………·…··23 附表……………………………………………………………………28 讨论…··………………………………………………………··……··29 结论…………………………………··“……………………………-．32 参考文献………………………………………………………………33 综述经鼻给予不同药物治疗中枢神经系统疾病的研究进展…………37 致谢…………………………………………………………………………47 个人简历……………………………………………………………………48 中文摘要 经鼻给予不同浓度的NGF对SODl-93A 小鼠内源性神经干细胞增殖作用影响的研究 摘 要 neuron 目的：运动神经元病(motor 的选择性侵犯脊髓前角细胞、脑干运动神经元、皮层锥体细胞及锥体束的 lateralsclerosis， 慢性进行性神经变性疾病。肌萎缩侧索硬化(amyotrophic ALS)是运动神经元病中发病率最高的一种类型，是选择性累及脊髓前角 细胞、脑干运动神经核以及大脑运动皮质的进行性致死性神经变性病，以 同时累及上、下运动神经元为特点【l翻。患者多在首次出现症状后的3～5 年内因肌肉逐渐萎缩无力、呼吸衰竭而死亡。目前，临床上除利鲁唑可以 有限的延缓患者病程外，尚无有效治疗手段【3】。干细胞移植治疗、基因治 疗等新方法尚在研究中【4．引，家族性ALS占5～lO％，其中20％与铜／锌超氧 化物歧化酶(SODl)基因突变有关。 神经生长因子(nerve growthfactor,NGF)由Levi 50年代首次在小鼠肉瘤细胞中发现。NGF具有维持神经干细胞的存活，促 进神经干细胞的增殖、分化及迁移，抑制细胞凋亡，营养神经元，保护和 修复受损神经等效应【7】。NGF可促进体外培养的神经前体细胞分化成未成 熟的神经元和星形胶质细胞。NGF有促进神经干细胞存活、增殖、分化及 定向迁移等作用，有助于中枢神经系统损伤后神经的再生及修复，为MND barrier 治疗带来了希望。由于肝脏的首过效应和血脑屏障(Blood．brain BBB)的阻挡，经典的静脉及皮下给药途径并未使药物最大程度的发挥效 所以，本实验研究采用经鼻给予SODl／j、鼠不同浓度的NGF观察其脑内海 转基因小鼠内源性神经干细胞的增殖调节作用，旨在寻找一种可以使NGF 绕过BBB并在中枢靶部位迅速达到最佳效应浓度的新型给药途径。 方法： 1实验模型及分组：100天雌性非转基因正常对照组小鼠6只，分为A 中文摘要 中国医学科学院实验动物研究中心提供)，随机分为：B组(空白对照组)6 只；C组(经鼻给药组)30只。再按照经鼻给予NGF不同浓度，将经鼻给 组6只。 2给药途径及方法：A组及B组经鼻给予生理盐水，C组经鼻给予NGF， 法连续给3天药。 3各组随机取一半标本通过免疫组织化学染色以显示内源性神经干 细胞及脑内增殖细胞。进行图像分析并计数Nesfin和Brdu阳性细胞数目， 分析比较A组、B组、C组之间脑内神经细胞增殖及内源性神经干细胞增殖 和分化的变化情况。 4另一半标本腹腔内注射戊巴比