CPAP的自身二聚作用对中心体连接的调控.pdfVIP

摘要 摘要 哺乳动物中心体，是主要的微管组织中心，包括一对定位在核附近的中心粒 和中心粒周围环绕的由大量蛋白聚集而成的周围物质(PCM)。中心体周期和细 胞周期相互配合以保证遗传物质的精确分配。从细胞分裂过程中产生的子细胞含 有两个紧密相连的中心粒，在有丝分裂后期或Gl早期，两中心粒间的紧密相连 消失，两中心粒间不再呈直角结构，取而代之的是在两中心粒近端形成松散的动 态蛋白质组成的连接，称为中心体连接。中心体连接形成是中心粒复制的前提， 并保持中心粒间的距离小于2／am。在G2／M期，中心体连接消散，发生中心体分 裂，两个中心体分离成为两个独立功能的个体形成两极纺锤体。扰乱中心体分裂 的时空动态性会导致细胞分离中基因组的不稳定性。事实上，在很多实体瘤中都 发现过中心体连接和分离的机能失常。在细胞周期中，中心体连接和分离的调控 机制还不太清楚。不过，一些参与中心体连接的蛋白如C-Napl，Rootletin， IhnBPl，Dynamin2，Cep68和Cep215等已经被报道。 CPAP也被称为Cenp．J，是中心体蛋白，包括5个卷曲螺旋结构域和一个甘 l 氨酸重复结构域称为G．BOX。包含第二个卷曲螺旋结构域的31-422氨基酸残 基是个微管．去稳定结构域，可以与微管蛋白a／13二聚体结合，423．607氨基酸残 基包括第3个卷曲螺旋结构域，是微管结合结构域。破坏0【螺旋结构或电荷性质 都会显著影响CPAP的微管去稳定能力。CPAP的某些突变诱导神经发育紊乱疾 病“常染色体隐性小脑畸形(MCPH)”导致人类大脑生长的严重缩小。 会诱导中心体分裂的增加，说明CPAP参与了中心体连接。使用免疫共沉淀和 里，我们报道了CPAP在间期细胞中形成同源二聚，第5个卷曲螺旋结构域参与 了这种二聚作用。而且，这种自身相互作用参与了中心体连接的维持并抑制了 G2／M期之前中心体的分裂。我们的生化研究显示，CPAP在体内也形成自身的 二聚。另外，无论是单体还是二聚体的CPAP对于细胞分裂的精确调控都是必需 的，说明CPAP同源二聚的时间动态性在细胞周期中被严格调控。我们的结果显 示，CPAP在有丝分裂期是被磷酸化的，而这种磷酸化解除了其分子间的相互作 用。总之，细胞周期调控的磷酸化作用精密调节了CPAP分子间相互作用的动态 性和中心体的分裂，保证了细胞分离中基因组的稳定性。综上所述，有丝分裂期 CPAP的自身相互作用被磷酸化作用负调控，这对于中心体连接和分裂在细胞周 期中的精确调控有重要作用。 VI 摘要 关键词：CPAP自身相互作用中心体连接中心体分离 ⅥI Abstract Abstract Mammalian centrosomes，the majormicrotubule·organizingcenters(MTOCs)， consistofa ofcentrioles localizedatthe ofthenucleusand pair normally periphery surroundedanumberof referredtoas material by proteinscollectively pericentriolar coordinationoftheeentrosomeandcell ensuresanaccurate (PCM)．The cycle cycle distributionof cells fromcelldivisio