血管紧张素Ⅱ对HepG2细胞葡萄糖代谢的影响及其缬沙坦的干预作用.pdf

摘要 血管紧张素II对HepG2葡萄糖代谢的影响及 缬沙坦的干预作用 研究生 高率斌 导师 栗夏连 郑州大学第一附属医院 内分泌科 郑州450052 郑州大学第一附属医院 郑州450052 摘要 背景与目的 高血压和糖尿病是人类的二大杀手，二者关系密切并与心，脑血管疾病的 Inhibitor，ACEI) 发生有关。血管紧张素转换酶(AngiotensinConvertingEnzyme Blocker，ARB)广泛用于高血 和血管紧张素受体阻断剂(AngiotensinReceptor 压的治疗及延缓糖尿病肾病的发展。多项循证医学研究(HOPE，LIFE，VALLE 察雷米普利和罗格列酮减低糖尿病前期向糖尿病转换为目的的DREAM研究， 未证明雷米普利可显著减少糖尿病前期发展为糖尿病。以评价长期服用那格列 奈和缬沙坦对延缓IGT患者进展为糖尿病的效果为目的的NAVIGATOR研究揭 GlucoseTolerance， 示缬沙坦(代文)可减少14％的葡萄糖耐量异常(Impaired 病的转化?血管紧张素2(AngiotensinII，AnglI)对糖代谢的影响如何?ARB 的代表之一：缬沙坦(代文)可否阻断其作用?AnglI对糖代谢的影响有无血管 紧张素2受体以外的作用是本文的研究目的。 除了多项循证医学观察到的现象外，AngII，ACEI及ARB对葡萄糖代谢及 摘要 胰岛素分泌和作用的影响已有一些研究结果。Angll可影响胰岛素的信号传导， 而ACEI和√6岫可改善胰岛素的信号传导。此外，ACEI和ARB可促进骨骼肌 毛细血管扩张，葡萄糖转运体4(GlucoseTransporter4，GLUT4)转位至细胞膜， 促进骨骼肌对葡萄糖的摄取，近期的研究表明：ACEI或灿强除了减少血中游 离脂肪酸水平外，还可增加血中脂联素水平。前者可导致胰岛素抵抗和肝糖输 Y的活性， 出增加，而后者可增加胰岛素的敏感性。部分—6岫尚有激活PPAR PPAR Y是噻唑烷二酮的作用靶点。AngII可抑制胰岛素的一相分泌，而ACEI 和—6岫可改善胰岛素分泌。肝脏在糖代谢中起着重要的作用，而hmgII对肝脏 糖代谢的影响及ARB可否阻断其作用研究甚少，因而我们设计了该研究。 本研究采用血管紧张素II、缬沙坦与HepG2细胞株共同培养，了解血管紧 张素II对HepG2细胞糖代谢的影响，并观察缬沙坦在该过程中能否发挥拮抗血 管紧张素II的作用，并进一步明确血管紧张素II影响HepG2细胞糖代谢以及缬 沙坦干预作用的分子机制，为临床上同时预防和治疗高血压及糖尿病提供理论 依据。 方法 中AngII受体的存在。 2．1 HepG2细胞分为：对照组，血管紧张素II组(终浓度分别为i0—3mol／L、 移去原有培养液，加入150ulDMS0使结晶物溶解，用摇床震荡10min，置酶标仪， 测定492nm处吸光度(0D值)，以oD值反映细胞活性和数量的多少。各浓度血 管紧张素II组oD值与对照组oD值比值反映细胞存活率。 2．2 48h，GOD-POD法测各组上清葡萄糖的浓度，以不铺细胞的空白孔葡萄糖含量均 值相减，得出各孔细胞的葡萄糖消耗量。比较各组间差异，确定对肝脏糖代谢 作用最明显的Angll的浓度和作用时间。 3．HepG2细胞分为五组：对照组，血管紧张素Ⅱ组，缬沙坦组(终浓度为 II 摘要 张素II+缬沙坦组，血管紧张素II+缬沙坦