线粒体D环区域单核苷酸多态性和脂肪肉瘤患病风险关系研究.pdf

IUHII I IIII IIIIIII I III 目 录 Y2784751 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………3 研究论文 线粒体DNAD环区域单核苷酸多态性与脂肪肉瘤患 病风险关系的研究 前言……………………………………………………………………60日U舌…………………………………………………………………… 材料与方法……………………………………………………………7 结果……………………………………………………………………14 附表…………………………………………………………．………．．15 讨{仑……………………………………………………………………16 结论……………………………………………………………………18 参考文献………………………………………………………………19 综述人类肿瘤中线粒体DNAD环区基因突变相关研究进展…………23 致谢…………………………………………………………………………35 个人简历……………………………………………………………………37 万方数据 中文摘要 线粒体DNA D环区域单核苷酸多态性与脂肪肉瘤患病风险关系 的研究 摘 要 目的：线粒体DNA (SNPs)己被报道与多种类型的癌症及恶性肿瘤的患病风险有关。多种肿瘤 细胞中线粒体D一环已成为基因突变和多态性研究热点，但对于mtDNA D．环与脂肪肉瘤的相关研究却很少。在本实验中，我们共测序了82个脂 肪肉瘤患者的D．100p区域基因排序并分析了它们在肿瘤风险的生物标志 物方面的预测性，以此来评估线粒体DNA SNPs与脂肪肉瘤患病 D．100p 风险的相关性。 方法： 疗的脂肪肉瘤患者的血液样本共105个，选取能够完善资料的共82个， 同时收集来自100个健康人的血液样本作为对照。采集实验对象的相关临 床信息，完善临床资料。 及健康人的线粒体DNA，提取后将其置于．20。C恒温冰箱中保存备用。 3对目的基因进行PCR扩增和序列分析，上游引物序列为5’ 。CCCCATGCTTACAAGCAAGT-3 7 5 AAGCTAC．3 7．GCTTTGAGGAGGT(核苷酸602．583)。扩增结束 后对PCR产物进行电泳提纯，应用循环测序法对合格的PCR扩增产物进 行测通测序。 4通过电话方式对脂肪肉瘤患者进行随访，同时收集患者住院期间的 临床表现及特征等。从已经完成的脂肪肉瘤患者线粒体D环区的982bp 序列中找出单核苷酸多态性位点，参照基因数据库AC000021号数据， 对不同单核苷酸基因多态位点与脂肪肉瘤患者患病风险的关系进行分析。 5统计分析：应用四格表贮检验的统计方法对实验数据进行统计分 1 析。所有的数据处理均用SPSS8．0软件进行统计分析，P0．05被认为其 差别具有统计学意义。 万方数据 中文摘要 结果： 1在脂肪肉瘤组以及对照组的长为982bp的线粒体D环区域我们共 发现78个线粒体单核苷酸基因多态位点，其中的19个位点在患者或者对 照组中的频率≥5％，可以用来分析患者预后情况。 2应用铲检验在对单个SNPs进行分析时，在脂肪肉瘤患者中发现 共有6个线粒体基因单核苷酸基因多态位点与脂肪肉瘤患病风险之间存