印楝种仁成分的化学及其活性成分的研究.pdf

摘要 indica 印楝(Azadirachta A．Juss，neem)属楝科、速生常绿乔木。印楝种仁中含有 多种具有生物活性的化合物，其中萜类化合物是印楝中所含的最重要的成分，本文研究 了印楝种仁中含有的多种化学成分，并对萜类活性成分进行了重点研究。 首次利用常压水蒸汽蒸馏法得到印楝种仁中的挥发性成分。采用GC．MS联用手段对 种仁中的挥发性成分进行分析和结构鉴定，共分离了16个化合物，鉴定出15个，其中 含硫化合物12个。这些含硫化合物占总挥发性成分的89．63％，它们可以分为脂肪族的 二硫、三硫或四硫化物和硫代杂环化合物二大类。含量最高的丙基，烯丙基三硫化物占 总挥发性成分的55．83％。首次报道在印楝种仁中含有3．乙基．5．戊基．1，2，4．三硫代环戊烷 和5-乙基·7·戊基一l，2，3，4，6一五硫代环庚烷二个新的硫代杂环化合物。 从印楝种仁中分离得到10个单体化合物，并鉴定了其中9个化合物的结构，证实为 azadirachfin I；azadiraehtinH；azadiraehtinD；azadirachtin A；azadirachtinB： 析了印楝素提取物，共分离了17个化合物，通过离子阱的一级和二级质谱碎片鉴定了其 中14个化合物，证实了印楝种仁提取物中除含有以上9个化合物外，还含有的三萜类化 acetate。 通过GC-MS方法鉴定出印楝油中的脂肪酸8种，分别是软脂酸，十七烷酸，硬脂酸， 油酸，亚油酸，亚麻酸，花生酸和二十二烷酸。其中含量较高的四种是油酸，亚油酸， 硬脂酸和软脂酸，它们占总脂肪酸化合物的700／0。不饱和脂肪酸油酸、亚油酸和亚麻酸 的含量占总脂肪酸的64．38％。首次发现在印楝种仁中还含有软脂酸(C160)和二十二烷 酸(Cz2：o)两神饱和脂肪酸。 获得了通过分级萃取、硅胶柱层析和重结晶的手段，从印楝油中获得具有抗生育活 性的化合物的分离和制备方法，该化合物经过uv，m，JHNMR和13cNMR等手段鉴 定为2-十八酸4十六酸_2，4-二戊酯。 建立了印楝种仁中最重要的三萜类活性成分印楝素的HPLC分析方法，该方法印楝 300rig。在此基础上研究了印楝素的高效提取及精制工艺，采用溶剂沉降法精制印楝素提 取物可将印楝素的含量提高到“％。采用活性白土吸附法可去除印楝素提取物中的黄曲 霉素，同时提高印楝素含量，对比了硅胶、Florisil和C18三种填料的层析法精制印楝素 前粗提取物的的2．6倍，3．7倍和3．1倍。 研究了介质酸碱性、温度和紫外光照等因素对三萜化合物印楝素的稳定性的影响， 表明紫外光照对印楝素的稳定性影响最大。首次研究了阿魏酸、没食子酸、芦丁和芦荟 苷四种天然紫外光吸收剂对印楝素紫外光稳定性的影响，在添加四种天然紫外光吸收剂 的条件下，印楝素的稳定性均比未加稳定剂时有所提高，其中芦荟苷对印楝素稳定性提 高的作用最为明显，它可将印楝素的稳定性提高一倍以上。对比研究了水杨酸苯酯、2,4 二羟基苯酮、对氨基苯甲酸和4,4’二羟基苯酮四种合成低毒紫外光吸收剂对印楝素的稳 定性作用，它们的作用的顺序是：水杨酸苯酯2，4二羟基苯酮对氨基苯甲酸4，47二羟 基苯酮，它们可将印楝素的稳定性提高到未添加前的3倍、2．6倍、1．4倍和1．3倍。 产物的LC—MS特征离子碎片表明，甲醇溶液中的nimbin在02条件下经紫外光照射，生 高于相应的nimbin和salannin。 成功制备了印楝素提取物微胶囊创新产品，并通过正交设计实验，得出最优化的微 胶囊制备工艺为：B一环糊精与印楝素提取物的质量比为2：1；溶剂中乙醇比例为50％： 温度25C；搅拌40rain．在所筛选的实验条件下，印楝素提取物与环糊精能够形成较稳 定的微胶囊，其包结率可达86．7％。所选实验条件温和，在该条件下基本不会导致印楝 素的分解。对印楝素提取物微胶囊的稳定性研究表明，B-CD包结成囊后印楝素对光和 热的稳定性明显提高。相同印楝素有效浓度时，印楝素微胶囊粉剂对棉铃虫幼虫毒杀效 果及幼虫发育进度的影响效果均好于印楝素原药。 关键词，印楝，化学成分，三萜，印楝素，微胶囊