外源信号物质对肉苁蓉种子萌发体的影响研究.pdfVIP

第3O卷 第2期 电 子 显 微 学 报 Vo1．30．No．2 2011年 4月 JournalofChineseElectronMicroscopySociety 20l1—04 文章编号：1000~281(2011)02—153-05 外源信号物质对肉苁蓉种子萌发体的影响研究 陈虞超 ，李 苗，甘晓燕，石 磊 ，宋玉霞 (宁夏农业生物技术重点实验室，宁夏 银川 750002) 摘 要 ：肉苁蓉(CistanchedeserticolaY．C．Ma)是沙生根寄生植物 。采用激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)，对种子经 外源信号物质氟草敏 (Norflurazon)、2，6-二 甲氧基对苯醌(DMBQ)处理后萌发产生的类胚根状体、初生吸器的细胞 形态；ca 浓度、囊泡运输的变化情况进行了观察研究。结果表明，肉苁蓉种子萌发产生的类胚根状体顶部的细胞 为多面体，细胞小，排列紧密，内含物较多，中部大多为长方形薄壁细胞，内含物少；经DMBQ处理后类胚根状体细 胞的钙离子浓度升高，囊泡运输加强。研究结果为揭示外源信号物质对肉苁蓉寄生影响提供 了理论依据 。 关键词 ：外源信号物质 ；激光扫描共聚焦显微镜 ；肉苁蓉 ；种子萌发体 中图分类号 ：R282；Q336 文献标识码 ：A 肉苁蓉 (CistanchedeserticolaY．C．Ma)为列 当 对苯醌 (DMBQ)购 自东京化成公司，玻璃纤维滤纸 科 肉苁蓉属 (Cistanche)植物 ，寄生于藜科植物梭梭 购 自Whatman公司，其他试剂均为国产分析纯。激 (Haloxylonammodendron(C．A．Mey．)Bunge)的根 光扫描共 聚焦显微镜仪器型号为 ZEISSLSM 510 部 。被列为名贵中药材的上 品，素有 “沙漠人参”之 META。 称 。由于 自然作用和人为过度放牧使 肉苁蓉和寄主 1．2 方法 梭梭均处于濒危境地 ，现为国家二级保护植物 ，被列 1．2．1 种子萌发 入 《中国植物红皮书》。近年来 ，有关 肉苁蓉寄生机 将 肉苁蓉种子经 25℃蒸馏水浸泡 12h，然后用 理 的研究成为热点，已开展了肉苁蓉种子萌发特性、 70％乙醇消毒 30S，无菌水清洗 3次 ，再用 0．1％次 形态发育机理 、寄生生理生化 、繁育系统等方面的研 氯酸钠消毒 15min，无菌水清洗 5次。之后 ，将经 1 究工作 。国内外研究者普遍认为 肉苁蓉的寄生 ~mol／L氟草敏处理3h后的种子摆放在铺有玻璃纤 生长与外源信号物质 的影响有关 。本研究利用 维滤纸的无菌培养皿 中，在 25％、湿度 80％的条件 激光扫描共聚焦显微镜对 肉苁蓉种子经外源信号物 下于恒温培养箱 中暗培养 8天。 质作用后萌发产生的类胚根状体 、初生吸器 的细胞 1．2．2 类胚根状体细胞形态观察 形态 ，以及细胞的钙离子浓度 、囊泡运输的变化情况 将萌发后 的肉苁蓉种子放入浓度为 5~mol／L 进行 了观察研究，为外源信号物质对 肉苁蓉种子萌 的PI染液 中，浸染 1min后迅速取 出用蒸馏水冲洗 发及吸器形成作用机理方面的研究提供重要的理论 2次 ，置于载玻片上后用蒸馏水封片。利用激光扫 依据 。 描共聚焦显微镜在激发波长为 543nm、发散波长为 560nm的条件下观察萌发种子的类胚根状体细胞 1 材料与方法 形态 。 1．1 材料 1．2．3 初生吸器细胞形态观察 肉苁蓉 (CistanchedesertieolaY．C．