PDMAbPEObPDMA的合成及用于毛细管电泳分离蛋白质研究.pdf

摘要 摘要 毛细管电泳(capillary 及样品消耗量少等特点，成为多肽、蛋白质、DNA和氨基酸等生物分子分离的 一个有力工具，并在生物工程、医学药物等生命科学领域以及食品检测等领域显 示了极其重要的应用i订景。但是毛细管表面的硅羟基(Si．OH)电离为Si．O。， 使得毛细管电泳分离蛋白质过程中管壁与蛋白质尤其是碱性蛋白质会产生强烈 的吸附，从而造成蛋白质分离效率下降、峰对称性差、迁移时间重现性差、蛋白 质回收率低等问题。 目前，为了抑制蛋白质在毛细管壁的吸附，人们常采用的方法主要有极端 pH值法、添加剂法、外加电场和聚合物涂层法等。极端pH法和添加剂法不利 于分离选择性，甚至会引起蛋白质变性：外加电场则受目自，J．实验仪器条件的限制， 且实验结果受焦耳热影响：相较而言‘聚合物涂层法不仅高效而且稳定，可以有效 地解决这个问题。毛细管涂层的形成大致可分为两类：共价键合和物理吸附。其 中共价键合涂层稳定性好但制备过程复杂且难以控制：物理吸附涂层的制作简单 且稳定性较好，因而备受青睐。目前已月j于物理吸附改性毛细管壁的聚合物主要 有中性聚合物和阳离子聚合物。其中有聚ⅣⅣ-二甲基丙烯酰胺(PDMA)、聚 烷(PEO)等。 transferradical 本论文通过原子转移自由基聚合(atom 方法合成了双亲水性三嵌段共聚物聚((Ⅳ，Ⅳ-二甲基丙烯酰胺)一6一环氧乙烷．b． (Ⅳ，Ⅳ．二甲基丙烯酰胺)) 分离蛋白质，取得了较好效果，主要研究工作如下： 共聚物，并用核磁共振氢谱(1HNMR)对其结构、凝胶渗透色谱(GPC)对其 分子量及分子量分布进行了表征。 作用，特别是相对疏水的PDMA链段，它可以使聚合物涂层的稳定性大大增加。 量、缓冲溶液pH值及共聚物结构对碱性蛋白质分离效率的影响，同时考察了该 三嵌段共聚物对酸、碱、中性混合蛋白质以及生物大分子的分离效果。 摘要 涂层管与空管在蛋白质吸附前、蛋白质吸附中和蛋白质吸附后的EOF，发现 稳定性得到控制，是性能优良的涂层材料。 关键词：毛细管电泳蛋白质分离物理涂层三嵌段共聚物 Abstract ABSTRACT offers highseparationefficiency，less Capillaryelectrophoresis(CE)，which and andshort time，has asa samplereagentconsumptionanalysis emergedpowerful methodfor of as biomacromolecules，such analytical separation peptides，proteins， andnucleic of is fortheir DNA acids．However，theseparationproteinscomplicated toadsorbontothe surfaceoffusedsilica tendency negativelycharged capillaries，and thisis trueforthe ofbasic will particularly separation proteins．Theadsorption