《16S rRNA的分子生物学方法分析牛奶中的细菌菌群 Molecular Biological Analysis of Bacterial Community in Milk Based on 16S rRNA Gene》.pdfVIP

255 ※分析检测 良晶科学 2013,V01．34,No．20 16S rRNA的分子生物学方法分析 牛奶中的细菌菌群 李引强L2，朱宝利2，吴俊2，王秋涯3，高可心4，律娜2一，张庆波1 100101； (1．河北联合大学基础医学院，河北唐山063000；2．中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100084：4．中国人民大学附属中学，北京 3．清华大学附属中学，北京 100080) 摘要：选择4个不同生产厂家的市售牛奶作为研究对象，提取牛奶中细菌的基因组DNA，利用聚合酶链式反应 rRNA．V3区序列信息，运用生物信息学分析牛奶中细菌种类、菌 (PCR)．克隆．测序的方法获得牛奶中菌群的16S 群多样性和菌群结构：荧光定量PCR法测定样品中的细菌总数。结果表明：各品牌牛奶中均含有大量细菌的16S rRNA-V3区DNA序列；牛奶样品中测序共得至11472条16SrRNA．V3区序列，其中有452条序列可以明确鉴定到属，包 括3个革兰氏阳性菌属和14个革兰氏阴性菌属；20条序列可以鉴定到纲的水平。各品牌牛奶中细菌总数均处于相对 较高水平；4个厂家牛奶间菌群分布不同，菌群多样性存在差异。 关键词：市售牛奶；16S核糖体核糖核酸(16srRNA)：菌群分布；细菌总数 Molecular ofBacterial inMilkBasedon16SrRNAGene BiologicalAnalysis Community LI Jun2，WANG Na2一，ZHANG Bao．1i2，WU Ke．xin4，LU Yin．qian91…，ZHU Qiu．ya3，GAO Qing．b01 ofBasicMedical United (1．College Sciences，HebeiUniversity,Tangshan063000，China： and 100101，China； 2．KeyLaboratoryofPathogenicMicrobiologyImmunology,ChineseAcademyofSciences，Beijing 3．The SchoolAttachedto 100084，China； High TsinghuaUniversity，Beijing 4．The SchoolAtiliatedtoRenmin Hi【gh UniversityofChina，Beijing100080，China) Abstract：Thenumberofbacteriainmilkhas attentionasthenewnationalstandardis gainedgrowing dairy areconcernedabo