《N-乙酰半胱氨酸通过调控细胞周期蛋白加重乳鼠心肌细胞的衰老》.pdfVIP

·146 ．基础研究． N一乙酰半胱氨酸通过调控细胞周期蛋白 加重乳鼠心肌细胞的衰老 张凤祥 陈明龙杨兵 陈红武 曹克将 【摘要】 目的了解N一乙酰半胱氨酸(NAc)对心肌细胞衰老的影响及其机制。方法将培养 d组、5d组、10 的SD乳鼠心肌细胞随机分为1 d组、ld+NAc(1mmoL／L)组、5d+NAc(1mmoL／L) 组、10d+NAc(1mmoL／L)组。采用流式细胞仪检测细胞周期。采用实时定量PcR与westemblot等 方法检测p16INK4a、p21wAFl及Rb基因mRNA与蛋白水平表达的变化。采用B一半乳糖苷酶原位染 色试剂盒检测B一半乳糖苷酶活性的改变。结果5d+NAc(1mmoL／L)组、10d+NAc(1mmoL／L)组 G。／G。期细胞数分别为86．71％、91．23％，显著高于单纯5d组、10d组的82．13％、87．97％，尸均 0．01。5d+NAC(1mmoL／L)组、10d+NAC(1 d组、lo 值分别为0．48、1．31，显著高于单纯5 d组的o．35、o．74，P0．05与o．01。p16INK4a基因 d组、10 蛋白表达与B-actin比值分别为o．96、1．12，显著高于单纯5d组的0．31、0．49，P均0．01。 5d+NAc(1mmoL／L)组、10d+NAc(1 mmoL／L)组p21wAFl基因mRNA拷贝数与B吨ctin比值分别 为1．25、2．13，显著高于单纯5d组、10 d组的0．96、1．24，P0．05与0．01。p21wAFl基因蛋白表 d组、10 d+ 达与B．actin比值分别为1．22、2．16，显著高于单纯5d组的0．71、1．13，P均0．01。5 NAc(1mmoyL)组、10d+NAc(1mmoL／L)组Rb基因mRNA拷贝数与B_actin比值分别为0．18、 0．09，显著高于单纯5d组、10 d组的0．35、0．17，P均0．01。Rb基因蛋白表达与B吨ctin比值分别t 为O．84、0．33，显著低于单纯5d组、10d组的1．47、0．81，尸0．05与0．01。5d+NAc(1mmoL／L)～ 组、10 d d+NAc(1mm彬L)组B一半乳糖苷酶活性分别为29．71％、79．31％，显著高于单纯5d组、10 组的17．46％、58．24％，P均0．05。结论 NAC可通过增加p16INK4a与p21wAFl基因表达，抑制 Rb蛋白的磷酸化，从而促使心肌细胞周期阻滞于G。／G，期，p-半乳糖苷酶活性明显增强，加重细胞 ： 衰老。 【关键词】肌细胞，心脏； 乙酰半胱氨酸；细胞衰老 ofcell related inn∞na伽 N-a∞tylcysteinepr呻otedag．mgthr伽gll cycle adj瑚ting麟pr郫sion protein SD rat姐rdiomyocyt鹤Z黝ⅣG凡昭一髫in昭，C删胞ng一幻昭，瑚^BBing，C腿Ⅳ舶昭一例u，cA0‰一 面婚Depon脚m旷cord抽2哟，，见瑙￡4历Z施￡ed日却删旷Ⅳ0咖曙讹如of嘶洫昭毋，№彬昭2JOD29， ChiM co玳印。砌i昭。删}or：翻0‰彬。愕，E，m以：铷∞@咖u．ed“．cn Toobservethee虢ctsof inneon