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_紫外-可见分光光度法.ppt
分光光度法仪器测量误差 入射光源的不稳定 吸收池玻璃的厚薄不均匀 池壁不够平行 表面有水迹、油污或划痕等 光电池不灵敏、疲劳现象和检流计的刻度不准确等 以上因素造成的测量误差的总和,最后表现为产生透光度读数误差ΔT 误差的消除 入射波长的选择 根据吸收曲线,入射波长的选择应以溶液的最大吸收波长为宜。 在此波长处,摩尔吸光系数κ最大,测定的灵敏度最高。 若干扰物在λmax处也有吸收,在干扰最小的条件下选择吸光度最大的波长。有时为了消除其它离子的干扰,也常常加入掩蔽剂。 光度计读数范围的选择 误差的消除 透光度读数误差ΔT是一个常数,但在不同的读数范围内所引起的浓度的相对误差却是不同的。 Δc/c 误差的消除 在透光度T为36.8%时,浓度的相对误差有极小值。 为了减小浓度的相对误差,提高测量的准确度,一般应控制被测液的吸光度A在0.2 ~ 0.7(透光度为65% ~ 20%)。 当溶液的吸光度不在此范围时,可以通过改变称样量、稀释溶液以及选择不同厚度的比色皿来控制吸光度。 实际测定中选用参比的重要性 误差的消除 参比溶液的选择 原则:使试液的吸光度能真正反映待测物的浓度。 利用空白试验来消除因溶剂或器皿对入射光反射和吸收带来的误差。 纯溶剂空白:当试液、试剂、显色剂均为无色时,用纯溶剂(或蒸馏水)作参比溶液。 试剂空白:试液无色,而试剂或显色剂有色时,加入相同量的显色剂和试剂,作为参比溶液。 试液空白:试剂和显色剂均无色,试液中其它离子有色时,用不加显色剂的溶液作为参比溶液。 多组分的测定 吸收光谱不重叠 可分别在各自最大吸收波长出测定各组分而不互相影响。 在?1处测组分x,在?2处测组分y 在?1处测组分x;在?2处测总吸收,扣除x吸收,可求y 吸收光谱重叠 多组分的测定 可找出两个波长,在该波长下,二组分的吸光度差值较大,在该波长处分别测定两组分的吸光度Ax和Ay,由吸光度值的加和性得联立方程。 相对其他光谱分析方法来说,其仪器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度较快。 灵敏度高。如在紫外区直接检测Vc 时,其最低检出浓度可达到10-6 g/mL。 有较好的选择性。通过适当的选择测量条件,一般可在多种组分共存的体系中,对某一物质进行测定。 精密度和准确度较高。在仪器设备和其他测量条件较好的情况下,其相对误差可减小到1%~2%。可用于对微量组分的测定。 用途广泛。 紫外-可见分光光度法的优点 紫外-可见分光光度法的应用范围 几乎所有的无机元素和在紫外及可见光区有特征吸收的有机物或有机化合物都能用紫外/可见分光光度法进行测定。目前,紫外可见分光光度计已成为全世界历史最悠久、使用最多、覆盖面最广的常规分析仪器。 紫外-可见分光光度法的应用范围 紫外-可见分光光度法的应用范围涉及化学化工、医疗卫生、冶金地质、食品饮料、农业化肥、畜牧水产、机械制造、计量科学、环保、制药、生物、材料、石油等领域中的科研、教学、生产中的质量控制、原材料和产品检验等各个方面,进行定性分析、定量测定、纯度检查、动力学研究等等。 紫外分光光度法测定维生素B1片的含量 取供试品20片,精密称定,研细,称取片粉适量(约相当于维生素B125mg),置100ml量瓶中,加盐酸溶液(9→1000)约70ml,振摇15min使维生素B1溶解,再加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度,摇匀,用干燥滤纸滤过,精密量取续滤液5ml,置另一100ml量瓶中,加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度,摇匀,照分光光度法,在246nm的波长处测定吸收度,按C12H17ClN4OS.HCl的吸收系数为421计算,即得。 * 谢谢!! * 单击此处编辑母版标题样式 单击此处编辑母版文本样式 第二级 第三级 第四级 第五级 紫外—可见 分光光度法 岳阳职业技术学院 黎玄哲 第九章 紫外—可见分光光度法 概述 光吸收的基本定律 紫外—可见分光光度计 紫外—可见分光光度测定的方法 紫外—可见分光光度法的误差和测量条件的选择 紫外—可见分光光度法应用实例 分光光度法概述 基于物质吸收紫外或可见光引起分子中价电子跃迁、产生分子吸收光谱与物质组分之间的关系建立起来的分析方法,称为紫外可见分光光度法 物质对光的选择性吸收 光谱名称 波长范围 跃迁类型 分析方法 X射线 10-1~100nm K和L层电子 X射线光谱法 远紫外光 10~200nm 中层电子 真空紫外光度法 近紫外光 200~400nm 外层电子 紫外光度法 可见光
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