大脑性分化前性激素对雌鼠成年后下丘脑SDN-POA形态结构及其雌雄激素受体分布的影响.pdfVIP

大脑性分化前性激素对雌鼠成年后下丘脑8DN．POA 形态结构及雌雄激素受体分布的影晌 浙江大学医学院 精神病与精神卫生学 磺士研究盔 葵文滔 导 师 许毅 中文摘要 强髓 研究发现，大脑性定向的差异存襁神经解帮学蒺础。已知雄性大鬣下最麟 视前区的性别二型神经元(sDN_】PoA)数目及体积明显大于雌鼠，而且大脑憔 分纯兹绔予壤鬣注射雄激素，可导致S嬲嘻拍A雄燃纯，帮S瓒心羚A体积壤 犬，并最后影响成年鼠的性行为。本研究的目的燕通过给予大脑性分化前的雌 鼠外源性雄激素，在建藏了雌鼠同性恋模型的基础上，观察雄激素对下丘脑 S魏q幻A孩逮孛耱经缨憨嚣雌雄激褰受傣分布熬影响。劳为避一步进行溺经褰 神经分子生物学研究提供依据。 材辩器方法 l实验动物 sD晶系雌性大鼠和娥饿大鼠。 2实验方法 2．1实验过程 将新生SD大鼠分成3组，每组10只，包括对照雌鼠组、对照雄鼠组和干 预雌鼠组。对干预雌鼠组每只新生鼠，在出生第1天腹腔注射丙酸睾丸素 续注射3天。饲养至90天后开颅取脑，并将其浸泡于4％多聚甲醛溶液后固定。 根据下丘脑视前区所处位置，将经过固定的大鼠大脑以自制刀具组取出部分脑 组织，交病理科协助制作成石蜡标本，然后将其按每片5um的厚度切成脑片。 t 每切十片取四片，分别为A、B、C和D片。取得的石蜡切片脱蜡水化后，B片 素受体抗体作也c法染色。最后梯度酒精分色，二甲苯透明后封片。完成染 色的脑片，用光学显微镜进行观察和对脑片进行筛选。筛选出的脑片将被拍照， 然后进行图像处理，并最后由2名独立的观察者对图像进行分析。首先该2名 观察者各自在C片上手工界定出SDN．PC)A核团的覆盖范围，并根据C片中所 团内的雌雄激素受体分布情况。 2．2实验观察指标 a)神经细胞密度：Nissl染色片(c片)中用性颗粒数为神经细胞元数。 计算SDN_】POA核团的面积和阳性颗粒数就可得知核团内的神经细胞 密度。 b)雌雄激素受体分布：雌雄激素受体阳性反应为黄色到棕褐色。通过计算 阳性细胞数和总细胞数可得出图象中sDN巾oA核团内的雌、雄激素受 体阳性表达率。 3统计方法 2 11．O蠡)r 运用sPss wind0粥统计软件包进行统计分析，计量数据结果用 ；±s来表示。对大脑核团神经元细胞密度及雌、雄激素受体阳性表达率的分析， 采用方差分析的LsD方法对组间进行检验。 结果 1三组大鼠之间SDl帅OA核团内神经元密度的比较 干预雌鼠组跳PclA核团内神经元密度明显大于对照雌鼠组，差异具有 ， 非常显著性意义C砌．001)；而与对照雄鼠组比较，其神经元密度也大于对照 雄鼠组，差异有统计学意义(po．05)。对照雄鼠组S聊¨-oA核团内神经元密 度也明显大于对照雌鼠组，差异具有显著性(P(o．01)。 2三组大鼠之间SDN-PQA核团内雌激素受体表达率的比较 干预雌鼠组sDl忡OA核团内雌激素Ⅸ受体阳性表达率明显低于对照雌鼠 组，差异有非常显著性(P0．001)；而与对照雄鼠组比较，其雌激素a受体阳性 表达率数值低于对照雄鼠组，但差异无统计学意义(，O．05)。对照雌鼠组 sDN-POA核团内雌激素伍受体阳性表达率明显高于对照雄鼠组，差异有统计学 意义(Po．05)。 干预雌鼠组sDN．．PoA核团内雌激素B受体阳性表达率介于对照雄鼠组和对 照雌鼠组之间，但是三组大鼠组间比较均无统计学意义(p岫．05)。 3三组大鼠之间SDN-PoA核团内雌激素受体表达率的比较 干预雌鼠组SDN．PoA核团内雄激素受体阳性表达率明显低于对照雄鼠组， 也明显低于对照雌鼠组，差异均有显著性(P．(0．001，P．，o．01)。对照雄鼠组 SDN．POA核团内雄激素受体阳性表达率明显高于对照雌鼠组，差异有非常显著 性意义(P．《0．001)。