转化生长因子β1基因多态性和煤工尘肺关系的研究.pdf

郑卅l大学2006届硕+毕业生论文 转化生长凶子Bl薹堕墨查竺!；生堡三尘堕茎墨望!窒 转化生长因子B1基因多态性与煤工尘肺关系研究 研究生 郝长付 导师 吴逸明 一 姚武 郑州大学公共卫生学院劳动卫生与职业病教研室 郑州 450052 中文摘要 尘肺病是目前我国职业病中发病率最高、死亡危险性较大、对劳动者危害最 严重的一类疾病，据统计目前我国尘肺病例约占职业病患者总人数的近三分之 二。尘肺发病机制十分复杂，迄今为止尚难以圆满解释其发生过程。对其发生发 展起关键作用的分子机制尚不清楚，也缺乏对其根治或阻止进展的方法。因此， 控制尘肺病的关键是预防。及时检出易感者即高危人群，限制其从事粉尘作业是 重要的预防措施之一。尘肺病个体易感因素，特别是遗传因素研究在国际范围内 已经受到重视。 目前国内外研究者认为多种细胞因子在肺纤维化形成过程中发挥着重要作 l(TGF—B 用，其中转化生长因子p 1)的作用尤其受到重视。TGF—B1可能通过 上调胶原和纤维粘连蛋白基因表达促进细胞外基质的增多，并可能通过降低蛋白 酶分泌和增加蛋白酶抑制剂的分泌抑制基质的降解，从而参与肺组织的纤维化过 程。研究资料提示TGF—B1基因启动子区一509位点存在多态性(cT)，而且有报道 称TGF—B1基因多态性与TGF—B1蛋白的分泌量及罹患某些疾病的危险度相关。此 研究以中困河南省汉族煤工尘肺患者110例和煤尘接触者110例为调查对象，分别 采集外周静脉血、提取全血DNA，采用聚合酶链反应一限制片段长度多态性 (PcR—RnP)技术对调查对象的TGF—B1基因一509位点的多态性进行检测，并用 肌TsA试制盒检测调查对象的J_(|L清TGF—Bl浓度。目的是初步探讨TGF—B1基因 一j()9化jj-的多态性在煤I‘尘肺发生发展过程中的可能作刚，以及T(；F～#1基因 郑州大学2006届硕士毕业生论文 转化生长冈子B1基因多态性与煤工尘肺关系研究 一509位点的多态性与血清TGF—Bl浓度之问的关系。通过研究，期望对于阐明基 因多态性与煤工尘肺等尘肺病的遗传易感性关系提供相关线索和参考依据，为进 一步加强和改进粉尘危害早期预防和控制措旌提供新的思路和手段。 调查对象与方法 一、调查对象 煤工尘肺组：均由河南省焦作市职业病防治所按现行的《尘肺x线诊断标准》 (GBz70—2002)确诊的河南省焦作市汉族男性煤工尘肺复诊患者110例，无免疫 系统疾病和其它肺部疾病，自愿合作。接尘工种均系掘进工和采煤工，粉尘类型 为混合型。 煤尘接触组：在相同矿区选择男性汉族有确切煤尘接触史的掘进工和采煤工 110例，结合粉尘作业健康检查拍摄高仟状x射线后前位胸片排除煤工尘肺，并 排除免疫系统疾病和其它肺部疾病。 二、调查方法 (一)问卷调查 每位调查对象均接受问卷调查，内容包括：个人一般情况、粉尘作业史、尘 肺病诊断史、既往病史和家族史等。 (二)血样采集和DNA提取 全部研究对象取清晨空腹静脉血6ml，3 ml离心分离血清，4℃保存备用： 3ml用于提取全血细胞DNA，一20℃保存备用。 (三)TGF—B 1基因多态性检测 通过DNA聚合酶链反应(PCR)对包含TGF—B 1基因编码区启动子一509多态 性位点的DNA片段进行扩增，限制片断长度多态性(RFLP)分析技术鉴定其基因 型。 (四)血清TGF—B1浓度的检测 采用双抗体夹心队fs^法检测血清TGF—B l浓度，实验操作严格按照试剂 盒说明书进行。 (五)统计学分析 II 郑州人学2006届硕士毕业生论文