成骨细胞FGF23的表达和局部调节的分析.pdf

成骨细胞FGF23的表达与局部调节研究 摘要 成骨细胞FGF23的表达与局部调节研究 中文摘要 目的： factor growth23，FGF23)表达及钙、磷、甲状旁腺激素(parathyroid 调节机制。 方法： 1．体外分离培养新生大鼠头盖骨细胞，应用碱性磷酸酶(Alkaline 素红(Alizarinbordeaux 和蛋白印记(Western mol／L 磷(5mmol／L，p甘油磷酸钠，IB-GP)、PTH(10’9 的作用； 2．分别于成骨细胞半汇合、汇合、基质堆积、矿化四个培养阶段获得不同分化状态细胞， 表达水平变化进行分化状态验证。采用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)和Westemblot 技术检测其FGF23 mRNA和细胞内FGF23蛋白水平的变化。 3．分别检测成骨细胞于增殖状态(半汇合)和分化状态(汇合阶段)的la．羟化酶基因 CYP27B 1和24-羟化酶基因CYP24A的mRNA表达水平，并通过1 Q．羟化酶底物25(OH)D3 源性1,25(OH)2D对FGF23表达的影响。 汇合前后FGF23表达的影响。 结果： mRNA表达水平与对照组相比差异无 (p0．001)，而CaCl2、p．GP、PTH刺激后FGF23 统计学意义。 成骨细胞FGF23的表达与局部调节研究 摘要 1,25(OH)ED功能的增强。 3．无血清培养时，在半汇合和汇合阶段加入100nmol／L 4． 较PBS对照组减少38％(p0．05)，半汇合阶段细胞的抑制作用不明显。 结论： 1． 外源性1，25(OH)2D能强烈刺激体外培养成骨细胞FGF23的表达。 上调。 增强有关。 关键词：成骨细胞；成纤维细胞生长因子23； 1，25二羟维生素D 中国分类号R336，R589．5 成骨细胞FGF23的表达与局部调节研究 摘要 The andlocal of mechanismsFGF23 expression regulation inratosteoblasts Abstract objective： To the offlbroblastfactor osteoblastina investigateexpressionpatterns growth23(FGF23)in culturemodelanditslocal therolesofthelocal of1 mechanisms，especially productionQ，25 D thecell and／or communicationinFGF23 in dihydroxyvitamin up—regulation osteoblasts． Methods： 1． The ratcalvarialosteoblastswereculturedinvitroandidentifledwithALPandalizari