提取测定大型海藻叶绿素a的新方法的研究.pdfVIP

提取测定大型海藻叶绿素a的新方法研究 捅 姜 本文从提取手段、提取溶剂和检测方法等几个方面综述了大型海藻叶绿素a 提取测定方法进展，并在此基础上选择青岛近海有代表性的十余种大型海藻作为 研究对象，使用浸提和研磨等手段，对不同溶剂提取测定这些大型海藻叶绿素a 的能力进行了对比分析，以此为基础分析了有机溶帮分子结构对大型海藻叶绿素 a提取能力的影响，并提出了新的提取测定大型海藻叶绿素a的方法。同时以褐 藻裙带菜为代表使用高效液相色谱分析了其在不同溶剂和提取手段下的色素组 成和含量的差异，并将分光光度法和高效液相色谱法的结果进行了对比分析。 通过12种有机溶剂对3大门类代表性藻种(裙带菜、孔石莼和角叉藻)的 浸泡提取实验，发现有机溶剂对大型海藻叶绿素a的提取效果和其分子结构有一 定关系，碳链短的溶剂浸提效果优于碳链长的溶剂，支链少的溶剂浸提效果优于 支链多的溶剂。同类溶剂中对称性强、偶极矩小和水溶性好的溶剂浸提效果优于 对称性弱、偶极矩大和水溶性不好的溶剂(醇类例外)。带有酰胺基、酮羰基、 醇羟基等宫能团的溶剂浸提效果较好。 本研究发现浸提性能既优于90％丙酮又优于DMF的有机溶剂—N，N．二甲 远比DMF低，价格也相差不大。以纯品叶绿素为对象的摩尔消光系数比较实验， 得出了以DMAC为浸提剂提取大型海藻叶绿索a的计算公式，并用DMAC对 14种大型海藻进行浸提实验对新的公式进行了验证： 对绿藻：叶绿素aO_g／m])=11．58E664—1．88风47 E630 对褐藻：叶绿素a0Ⅲg／m1)=11．14E664—0．40 E647—0．08E630 对红藻：叶绿素a(肛g／m1)=11．50E664·1．50 选择了8种溶剂提取裙带菜中色素并用于高效液相色谱分析。在选定的溶 剂中，ⅡⅡ、ISP和SBA会造成色素峰的变形，对色素的定性定量分析带来困难， 不适用于高效液相色谱分析藻类色素。根据峰形对溶剂性能进行排序： 尖锐，洗脱时间接近的色素能够实现基线上的分离，易于定性和定量，是优秀的 提取溶剂。 所选的8种溶剂对裙带菜进行浸提和研磨所获得的HPLC色索分析结果表 明：在浸提方法中，以Ethanol浸提所褥的Chl-a结果最高，其次是DMAC浸提。 究的试剂范围内，DMAC是提取大型海藻色素能力最优秀的溶剂。 对DMAC提取的大型海藻掖(以裙带菜做实验材料)用分光光度法和高效 液相色谱法测定，二者结果一致。 关键词：大型海藻；叶绿素a；浸提；研磨；N，N-二甲基乙酰胺 TheResearchofNewMethodfor Extracti onand Determinationof I a i n ChIorophylMacroalgae §Abstract； The ofmethodsforextractionand development determination ain ofchlorophyll werereviewedinthisthesis．Morethan macmalgae 10 werecollectedat macroalgaes of forresearchand thecoast directimmersionand were Qingdao grindingproced