LGR4基因敲除小鼠肺脏和肾上腺发育研究.pdf

LGR4 基因敲除小鼠肺脏和肾上腺发育的研究 摘 要 糖蛋白激素受体，包括FSH受体、LH受体和TSH受体，都有一 个富含亮氨酸重复序列的N端，代表着G蛋白偶联受体（GPCR）超家 族中的一个亚家族，即富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体（LGR）。 LGR4是这个亚家族中的成员，与上述三种受体具有一定的同源性。 通过对LGR4基因敲除小鼠的研究，目前对LGR4的功能已有所认识， 但主要集中在对生殖系统发育的影响上。此外LGR4也可能参与肾脏 的发育。与 FSH等糖蛋白激素受体的分布具有高度特异性所不同的 是，LGR4在全身许多器官组织都有表达。除了生殖系统和肾脏，LGR4 还在肺、肾上腺、骨骼等处表达，这也提示LGR4在体内可能具有广 泛的作用。然而目前对于LGR4在这些组织器官中的作用还知之甚少。 为了进一步揭示LGR4的功能，我们对LGR4基因敲除小鼠的肺脏和肾 上腺进行了观察与研究。 我们发现LGR4对于肺在胚胎晚期的发育以及小鼠出生时的呼吸 功能具有重要的影响。LGR4基因敲除小鼠在出生后短时间内出现呼 吸困难、紫绀，半数以上的小鼠在出生后28小时内死亡。组织学检 查显示，LGR4基因敲除小鼠的肺脏在胚胎晚期以及新生期存在明显 的形态学异常，包括肺泡数目显著减少，肺间隔增厚以及间质增多， 而在胚胎早期则与正常小鼠的肺脏没有明显差异。这些结果表明LGR4 基因的缺失主要干扰肺脏在胚胎晚期的发育和成熟，进而影响新生小 鼠肺脏的结构和功能并导致新生小鼠的早期死亡。对肺脏各种细胞增 殖和分化状态的考查进一步发现，在新生LGR4基因敲除小鼠肺中， 肺泡上皮细胞和间质细胞增殖异常活跃，而在正常小鼠这些细胞的增 殖此时已基本停止。与此相反，在基因敲除小鼠中Ⅰ型肺泡上皮细胞 的分化却受到了明显的抑制。细胞增殖和分化的异常可能是导致LGR4 基因敲除小鼠肺脏结构异常的直接原因。另外，实验结果也显示糖皮 质激素受体（GR）及其靶基因在LGR4基因敲除小鼠胚胎晚期肺脏的 表达明显下调，提示其可能参与肺的异常发育，并可能是LGR4下游 的一个靶分子。综上所述，LGR4通过对细胞增殖和分化的影响参与 肺脏胚胎晚期的发育，而GR的下调可能是其中重要的机制。 此外，鉴于糖皮质激素对肺胚胎晚期发育的重要影响以及 LGR4 在小鼠肾上腺皮质尤其是束状带细胞的高度表达，我们也考查了LGR4 对肾上腺发育及其功能的影响。结果发现，在3周的和成年的LGR4 基因敲除小鼠中肾上腺的结构均没有明显的异常，提示LGR4可能并 不参与肾上腺的发育。此外，虽然在基础和应激状态下，LGR4基因 敲除小鼠存在低皮质酮和高促肾上腺皮质激素（ACTH）的趋势，但与 正常小鼠之间没有显著性差异，表明LGR4 的缺陷并不显著影响肾上 腺的皮质酮分泌功能，尽管可能一定程度上降低了肾上腺皮质的反应 性。因此，LGR4可能并不参与肾上腺的发育和功能调节。 关键词：LGR4,GPCR,肺,肾上腺,发育,基因敲除 STUDY ON THE LUNG AND ADRENAL DEVELOPMENT OF LGR4 KNOCKOUT MICE ABSTRACT Glycoprotein hormone receptors, including FSH receptor, LH receptor and TSH receptor, share conserved leucine-rich repeats in their N terminals . These receptors represent a subfamily of G protein-coupled receptors (GPCR), namely leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor (LGR). LGR4 is one member of the subfamily and shares homology with the above glycoprotein hormone receptors. From the researches on LGR4 knoc