三种植物多糖提取工艺的研究及其分离纯化、结构解析.pdf

三种植物多糖提取工艺研究及其分离纯化、结构解析 摘要 多糖在自然界分布极广，广泛存在于动物细胞膜和植物、微生物的细胞壁中，是构 成生命的三大基本物质之一。多糖不仅是结构和能量物质，还直接参与细胞的分裂过程， 调节细胞生长。研究发现，多糖在抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗溃疡、抗突变、降血脂、 降血糖等方面具有医疗保健作用。本论文对广西特有或主要分布的金花茶、滇桂艾纳香 和麻风树这三种植物，进行多糖提取、纯化、结构分析研究。 1． 对金花茶多糖的研究 (1)为优化金花茶叶的多糖超声波辅助提取工艺，在单因素实验的基础上，选取料 8．2 液比、提取温度和时间三因素为自变量，多糖提取得率为响应值，应用DesignExpert 软件技术，采用响应曲面法设计、分析研究各自变量及其交互作用对多糖得率的影响。 利用响应面分析法，模拟得N-次多项式回归方程的预测模型，并确定金花茶叶多糖超 min。 声波辅助提取工艺的最佳条件为：料液比1：46．0，提取温度87．O℃，提取时间54．0 在此条件下，多糖提取得率为4．10％。提取三因素对多糖提取得率影响顺序是：提取温 度料液比提取时间。检测表明，金花茶干叶多糖含量为1．76％。 (2)对金花茶花的多糖采用了微波和超声波辅助提取工艺，运用响应面分析法对工 min， 艺进行优化，得出微波最佳条件是：料液比1：29．0，提取温度85．0℃，提取时间12．0 min，提取得率为3．479％。两工艺比较得出微波提取工艺优于超声波。多糖含量检测， 用超声波辅助提取，多糖含量为1．97％；微波辅助提取为2．14％。 (3)对金花茶叶多糖进行了结构表征。先对金花茶多糖提取液用膜分离，选取被膜 截留分子量≥100 KDa的多糖液为研究对象，J羽Sevag法反复脱蛋白，活性碳粉末脱色， 6F．F-反复柱层析纯化，经 活水透析，DEAE．纤维素柱粗分，再用琼脂糖凝胶Sepharose 100、8．312x105、8．997x 分别为1．054x 105Da． (4)对纯化组分CTLP．2先进行了酸水解和HPLC分析，其单糖由鼠李糖、阿拉伯糖、 半乳糖组成，摩尔比为2．12：1．96：4．02；然后进行甲基化、部分酸水解、高碘酸氧化和Smith 一残基的C6位O上，因此得出了CTLP．2的化学结构式。 II 2． 对滇桂艾纳香多糖的研究 (1)对滇桂艾纳香多糖的提取，在微波辅助提取单因素试验基础上，应用响应面分 析法研究了微波提取温度、时间和料液比三因素对多糖提取得率的影响，得出最佳提取 工艺条件是：提取温度75．0℃，提取时间11．0rain和料液L匕1：37．0，提取得率2．46％；提 取三因素对多糖提取的影响顺序是：提取温度料液比提取时间。检测表明，滇桂艾纳 香干全草多糖含量为0．876％。 (2)选取滇桂艾纳香粗多糖被有机膜(截留分子量段1～10KDa)截留所得粗多糖渗 透液部分，作为纯化研究对象。先用三氯乙酸和Sevag法相结合脱蛋白，然后用S．8大孔 MNaCl 树脂和A1203柱层析先后脱色处理，再过DEAE．纤维素柱分离，用0．15，O．3和0．5 6 F．F．反复柱层析纯化，纯化出BRP．1、 溶液洗脱粗分，最后用琼脂糖凝胶Sepharose 5840Da． 谱分析，阐明了它们的化学结构。 3． 对麻风树多糖的研究 (1)用四种不同工艺对麻风树叶多糖提取进行了比较，得出微波辅助提取工艺最好， 多糖提取得率为6．22％，超声波次之，提取得率为5．32％，新