DLX2基因促进脐带干细胞成骨分化.pdfVIP

口腔医学 2014年第 22卷第 5期 BeiiingJournalofStomatolo~v October2014．Vo1．22．N0．5 241· ． 基 础 研 究 ． DLX2基因促进脐带干细胞成骨分化 付晓茹 范志朋 曹钰 【摘要】 目的 研究Distal—lesshomeobox2(DLX2)对脐带干细胞成骨定向分化能力的影响。方法 成骨分 化诱导培养基诱导脐带干细胞体外成骨分化；逆转录病毒转染构建过表达DLX2的脐带干细胞 ，进行 DLX2获得性 功能研究 ；碱性磷酸酶活性实验检测成骨早期分化指标一碱性磷酸酶活性；茜素红染色及钙离子定量分析检测干 细胞体外矿化能力；实时荧光定量反转录PCR(realtimereversetranscriptionPCR，qRT．PCR)检测DLX2及成骨分化 相关基因一Sp7转录因子、骨涎蛋白和骨钙素的表达。结果 qRT．PCR结果显示，DLX2在牙周膜干细胞的表达明 显高于非牙源性干细胞一脐带干细胞、骨髓干细胞、脂肪干细胞。碱性磷酸酶活性结果显示过表达DLX2明显增强 脐带干细胞的碱性磷酸酶活性；茜素红染色及钙离子定量分析结果显示过表达DLX2明显增强脐带干细胞体外矿 化能力；qRT—PCR结果显示过表达DLX2明显促进Sp7转录因子、骨涎蛋白和骨钙素的表达。结论 DLX2具有促 进脐带干细胞体外成骨分化的潜能。 【关键词】 DLX2；干细胞；脐带；成骨分化 【中图号】 R318．17 【文献标识码】 A 【文章编号】 1006-673X(2014)05-0241-05 Distal-lesshomeobox2 enhanced theosteogenicdifferentiationpotentialofmesenchymalstem cellsderived from Wharton’Sjellyoftheumbilicalcord FU Xiao—ru，FAN Zhi-peng，CAO Ym BejiingKeyLaboratoryofTooth RegenerationandFunctionReconstruction，CapitalMedicalUniversitySchoolofStomatology，Bejiing100050，China 【Abstract】 0bjective ToinvestigatetheroleofDistal-lesshomeobox2(DLx2)intheosteogenicdifferentiation potentialofmesenehymalstemcellsderivedfromWharton’Siellyoftheumbilicalcord(WJCMSCs)．Methods Osteogenic mediumwasusedtoinducetheosteogenicdifferentiation ofWJCMSCs．RetroviralFlag—DD (2wasusedtoestablishthe stbalecellandover．expressedDLX2forGain．of-functionstudyin CMSCs．Theearlymarkerofosteogenicdifferentiation— ALPactivitywasdetectedbyalkalinephosphatase(AI )activityassay．Alizarin—redstainingandquantitativeanalysisof calcium were used to investigate the mineralization potentialsofWJCMSCs in vitro．Theosteogenesisrelated genes expressions，Sp7transcriptfactor(osterix，OSX)，bonesialoprotein(BSP)andosteocalcin(OCN)wereexaminedbyreal timeRT．PCR．Res