天然植物源性化妆品中致病微生物同步快速检测方法的建立.pdfVIP

新疆农业科学 2015，52(1)：109—114 XinjiangAgriculturalSciences doi：10．6048／j．issn．1001—4330．2015．01．018 天然植物源性化妆品中致病微生物 同步快速检测方法的建立 马雪艺 ，黄 玲 ，史 茜 ，伊力亚2，朱 漪 ，刘 俊 (1．新疆农业大学食品与药品科学学院，鸟鲁木齐 830052；2．新疆出入境检验检疫局技术中心，乌鲁木齐 830063) 摘 要：【目的】建立天然植物化妆品中3种动植物源致病菌的快速、敏感、特异的多重 PCR诊断检验方法。 【方法】设计肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)、铜绿假单胞杆菌 (Pseudomonasaeruginosa)和地衣芽孢 杆菌 (Bacilluslwheniformisin)3种菌的特异性PCR引物，通过单一、双重及三重PCR反应检测。 【结果】种动 植物源致病菌的单一、双重和三重 PCR均成功扩增出目的片断，没有非特异性扩增。通过对人工感染膏状染 发剂的PCR检测进行灵敏度验证，得出三种菌检出限：l~ebsiellapneumoniae为4．5×10CFU／mL；Pseudomonas aeruginosa为6×10CFU／mL；Bacilluslwheniforrnisin为 1×10CFU／mL。 【结论】建立的多重PCR反应系统具 有较好的特异性和灵敏性 ，为天然植物型化妆品中常见致病菌的检测提供了快速、简便、可靠的方法。 关键词 ：动植物源致病菌；肺炎克雷伯氏菌；铜绿假单胞杆菌；地衣芽孢杆菌；多重 PCR 中图分类号：S182 文献标识码：A 文章编号：1001—4330(2015)01—0109—06 TheEstablishmentofThreeKindsofPathogenicBacteriaSynchronization M ethodforRapidDetectionofNaturalPlant—．basedCosmetics MAXue—yi，HUANGLing，SHIQian，Yiliya，ZHUYi，LIUJun (1．CollegeofFoodandPharmaceuticalSciences，XinjiangAgriculturalUniversity，Urumqi，Xinjiang 830052，China；2．TechniqueCenterofXinfiangEntry—ExitInspectionandQuarantineBureau，Urumqi 830063，China) Abstract：【objective】TheprojectaimsattheestablishmentofmultiplePCRfast，sensitiveandspecific diagnostictestmethodforthenaturalplantcosmeticsin3kindsofanimalandplantsourcespathogenicbacteri— um，Klebsiellapneumoniae，PseudomonasaeruginosaandBacilluslichen@rmis．【Method】Thespecificprimers ofthePCR3kindsofbacteriaweredesignedofrdetectionbysingle，doubleandthreePCRreactions． 【Re- suit】Theresultsshowedthat3kindsofanimalandplantpathogens，bothsinglesourceandthreePCRwere successfullyamplifiedfragmentswithnonon—specificamplification．Throughthehaircoloringdetectionagent PCRonartificialinfectionofpastesensitivitytest．multiplexPCRreactionsystemwasestablishedinthisstudy whichshowedgoodspecificityand sensitivity：Klebsiell