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反义pBI12-NR-LEACS2双价表达载体的构建及其向番茄的转化.pdf
中文摘要
乙烯作为影响果实采后生理的重要因子,同时又是控制果实成熟衰老的关键所在,所以一直
是人们采后研究的一项重要内容。近年来,在模式植物拟南芥中乙烯感受和信号转导的研究取得
了很大的进展。但在果蔬成熟衰老研究的模式材料番茄中乙烯受体及信号转导的研究还不够深
入。到目前为止,己从番茄中分离lU六个乙烯受体基因,目PETRl的同源物LeETRI一6,但其功能还
远远没有被认识。利用分离到的番茄乙烯受体基因,参考拟南芥乙烯信号转导模式,搞清楚番茄
乙烯受体基因的功能,己成为我们研究的重点。在六个番茄乙烯受体基因中,NR(LeETR3)是比
较特殊的一个。其表达受果实发育严格调控,并表现出与跃变型果实乙烯生物合成变化趋势完全
一致。从NR基因的表达时机判断,它很可能是启动系统II乙烯的关键因子。
本文构建了反义pBIl21一NR-LEACS2双价植物表达载体并通过农杆菌介导法将其导入番茄,
研本究将有助于搞清NR蛋白的功能及其对乙烯生物合成的反馈调控机制,也有助于丰富乙烯理论
及果实成熟衰老机制。本研究取得的主要结果如下:
pGreen0029载体上,构建了第一个中间载体pGreen0029一NR
接到pLPl00载体上,构建了第二个中间载体pLPl00一NR
酶切获得大片段,二者连接后获得反义pBll21一NR—LEACS2双价植物表达载体
(4) 采用冻融法将反义pBll21-NR—LEAcs2双价植物表达载体转入土壤农杆菌EHAl05
(5)
种,经过PCR检测共获得7株PCR阳性植株
关键词:番茄,双价表达载体,构建。NR,转化
Abstract
all invarious and
important role physiological
Ethylene,whichplays very regulatory
asa inthe
of asfruit beenstudied coBtent
plant,suchripening·has major
process
developmental
the ten of and
receptionsignal
past years.theregulationethylene
physiology.In
postharvest
less
been themodel muchis
has studied in
transduction Arabidops缸,but
pathway extensively plant
aboutthesameresearchintomato--themodel materialof andsenescence
known plant ripening
from
offruitsand havebeenclonedtoma
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