固定化酶降解壳糖的研究.pdfVIP

浙江人学硕Ij学位论史 固定化酶降解壳聚糖的研究 ， 摘要 ，甲壳素是一利t丰富的I三I然资源，足地球上仪次于纤维索的第一二人丰 富i苛更新有机资源。壳聚枇是If{壳素经脱乙酰化处理的产物。在J11壳素／ ， 壳聚糖大分子l{1，出于其分f结构II，内外氢键的相互作用，形成了有序 的大分子结构，溶解性能很差。经过脱乙酰化处理生成的壳聚糖大分子 巾存在大量的游离氨基，使其溶／Wll-：fik大大改观，特别是分子量低1：l ／J低聚壳聚糖，更由于其独特的的q-Ni舌性和物化性质，使壳聚糖的应 用范围大大加宽。 同壳聚糖大分子相比低聚壳聚糖具有一些独特的功能性质，这些性 质包括低聚壳聚糖良好的水溶性、保湿增湿性、抑菌抗菌作用、抗肿瘤 和免疫促进作用等。同Ⅱ寸山于低聚壳聚糖所特有的各种生理活性和功能 性质，使其在保健食鼎、生物医约、¨用化妆品、医疗诊断,}llU-物生理 等方面具有独特的应用价值。 壳聚糖分子量通常在)L4一／J上开／j，若在适当的条件下，对其进行 一’ 降解反应，则能得到平均分子量小1：l万的可直接溶于水的水溶性壳聚 糖。通过降解反应得到低聚水溶性壳聚糖的制备方法大致可分为酸降解 法、氧化降解法和酶降解法三大类。 利用各种降解方法对壳聚糖进行降解处理，都可以得到低聚水溶性 壳聚糖。酸降解法降解过程较难控制，所得降解产物的分子量范削很 宽。虽然这种方法早已用于工业化，Ji产，各种分子量范围的壳聚糖产品 都能得到。但要得到特定分予星范围且具有较高收率的壳聚糖产品还是 比较困难的；酸解过程引入了强酸，还会造成一定的环境污染。氧化降 滞fff：人1≯坝I。学t)=沦史 解法普遍采用了多种试剂进行降解反应或降解产物的后处理，这给，“品 的分离、纯化增添了闲难。川刘l…’；，氰化降解方法在制备较岛分r量 范幽(1万止右)的壳聚槠，“l川0业为彳j利。酶降解法降解条件温阐J，反应 过程易于控制，易于得到所需分f-b}池刚的壳聚糖J“·16。但在选择合适 的酶利·以适合工业化火规模生产_J：尚存在困难。 阎定化酶比游离酶具有≯l：多j：-““的技术优点，国内外已有很多JIj壳 聚糖作为载体来固定化酶的{{J|。究报道，醣明以壳聚糖柬固定化酶是叨实 、 nJ行的技术：1本实验选取较为廉价的：卅专～性酶：木瓜蛋白酶、果胶酶 和纤维素酶，以壳聚糖为载休、戊：醛为交联剂来圈定化酶，探索湖定 化的最佳条件。然后用固定化木瓜蛋白酶、果胶酶和纤维素酶对蝉虾壳 聚糖进行降解并寻找降解反应的最佳条件，最后采取甲醇一丙酮溶剂分级 沉淀法剥降解产物进行料i分离，从而得到低聚壳聚糖。 本实验说明用壳聚糖为载体、戊-醛为交联剂来固定化木瓜蛋白 f 酶、果胶酶和纤维素酶是可行的且效率较高。I酶活回收率分别达到 ＼ 条件的选择上，戊二醛处理温度均为室温，处理删间均以8h为宜，木瓜 蛋白酶和纤维素酶的固定化pI{以8较好