梨f3h基因的隆及植物载体的构建及应用rapd技术对梨部分品种亲缘关系的探讨.pdfVIP

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2016-01-30 发布于四川
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梨f3h基因的隆及植物载体的构建及应用rapd技术对梨部分品种亲缘关系的探讨.pdf

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梨f3h基因的隆及植物载体的构建及应用rapd技术对梨部分品种亲缘关系的探讨

中文摘要论文第一部分概述了花色素基因工程研究进展。以成熟缸巴梨果皮花青素相关基因f3h基因的两个片段为模板，克隆得到了f3h基因eDNA全长，并对序列进行了 7％。在f3h 初步分析。核苷酸序列分析表明，该片段与苹果的f3h基因同源性高达9 基因两侧分别引入了酶切位点，以利于植物表达载体的构建，检测表明成功地将f3h 21载体。基因转入了pBll 论文第二部分主要介绍了RAPD在果树研究中的应用。对梨基因组DNA的提取作出探索，并以此为模板对影响RAPD扩增的重要参数进行优化试验，建立了梨RAPD反应 22．5mM、随机引的优化体系(PCR扩增体系条件是：20uI体积中，dNTP200uM、MgCl 物0．2“M、DNA模板50ng、Taq酶卜2u)。用该优化体系对梨部分品种进行鉴定，探讨了它们之间的差异和亲缘关系，聚类分析结果显示，西洋梨系统与东方梨系统之间亲缘关系较远，而砂梨与白梨亲缘关系较近，不能各自聚类。关键词：花青素；f3h基因；克隆；表达载体；梨；亲缘关系；RAPD Abstract inPartI．A The of wasstudied 1095bp progress anthocyaningeneengineering cDNA如U of whichrelatedto Was length ph anthocyaninbiosynthesis sequencegone itWas tothat cDNA cloned．nle showedthat identity ofDh sequence 97％homologous from WasalSOintroducedinto forthe research． apple．Thef3hgene pBll21 following in on was PartII．Based Themethodof DNAfrom studied isolatinggenomic pear that affectthe Was thatsomeessentialfactors the DNA．It might genomic compared and the RAPDreaction for avohrne ofRAPDestablished results system optimal pear(in reactionscontained2．5