茶黄素类分离纯技术及其生理活性研究.pdfVIP

摘 要 茶黄素类 (Theaflavins,TFs)是影响红茶品质的关键因子之一，国内、外大 量研究表明，其具有多种药理功能及保健功效，开发前景极为广阔。由于其分离 纯化技术难度大，限制了它的进一步利用。为了解决这一技术难题，本文首先采 用NKA大孔树脂富集TFs，效果明显，制得含量为85%的茶黄素类 (主要为四 种)，得率14.38%0茶黄素单体分离是本文的关键，本研究首次选用聚酞胺为分 离材料，对茶黄素进行薄层及柱层析分离。薄层分离研究表明，当展开剂为甲醇 一丙酮一冰醋酸，其三者比为8:5:3，预饱和时间为20min时，对TFs的分离达 到理想效果。前面七个峰的ltf值分别为:0.14,0.22,0.28,0.31,0.35,0.4, 0.48。此研究表明聚酞胺对TFs的分离是可行的。在此基础上对茶黄素类进行柱 层析分离，结果表明，当洗脱剂为甲醇一氯仿一丙酮一冰醋酸其比例为3:5:8:0.5 时得到7个明显不同的色段。分别收集第四、第五、第六、第七色段，经检测 (HPLC)发现，第四、第五色段仍有杂峰，第六色段为茶黄素单没食子酸酷 门F-3-G),含量为85%，第七色段为茶黄素 (TF),含量达93%。下F经进一 步纯化，其含量超过98% 由于柱层析对复杂产物的分离有限，本文对柱层析不能再纯化的第四、第五、 第六色段，首次采用制备型高效液相色谱进一步分离，第四色段制备到表儿茶素 没食子酸酷 (EGG)和化合物3，第五色段得到ECG和丁F-3-G，含量均超过 98%，第六色段为TF-3-G，其含量达到95%. 本文首次利用自制高纯TFs及其单体为材料，探讨其对唾液淀粉酶、脂肪酶 与环氧合酶的作用，旨在研究茶黄素物质在减肥及抗炎方面的效果。结果发现: TFs在0.08mg/mL时对唾液淀粉酶的抑制作用达92.77%，单体TF-3-G的为 78.03%,TF的抑制作用更是达到98.74%eTFs及单体TF-3-G有增强脂肪酶活 性的趋势，在其浓度为0.6mg/mL时使脂肪酶活性增加18.27%，而单体TF可抑 制脂肪酶的活性，抑制率为20.12%。环氧合酶 (包括COX-1和COX-2)是炎症 介质PG的关键合成酶，TFs对它不产生影响。而单体TF,TF-3-G则具有选择 性抑制COX-2的作用，抑制率分别为65.52%和60.78%，而它们对COX-1不产 生影响。以上研究表明茶黄素能作为脂肪代谢调节剂及新型抗炎药物开发. 关键词:茶黄素类;单体分离:唾液淀粉酶;脂肪酶;环氧合酶 StudiesonIsolationPurificationofTheaflavinsandIts PhysiologicalActivity Abstract Theaflavins(TFs)isthekeyinfluencefactoronblacktea.Agreatdealof researchincludingbothhomeandoverseasrevealsthatithasbrightdevelopment prospectduetoitsmultiplepharmacologicalfunctionandhealth-protection.Its furtheruseisblockedbecauseitisverydifficulttopurify.Tosolvethisproblem, NKA-macro-resinisfirstusedtoaccumulateUsinthispaper.Withthismethod， contentofTFsisupto85%(mainlyincludingfourkinds)andtherateofpreparation is14.38%.ThemonomersisolationofTFsisthekeypointinthisresearch,so polyamideisappliedforthefirsttimetoisolateUsbyHPTLC(HighPerformance ThinLayerChromatography)andcolumnchromatography.ByHPTLC,theresults revealthatthesolventsystemisthebestonewhenmethanol:acetone:aceticaci