Chapter南工大生物分离工程..pptVIP

Chapter 7色谱技术Chromatography 本章主要知识点 什么是色谱分离技术？ 色谱分离技术的分类 什么是色谱柱的理论塔板数以及如何计算？ 吸附色谱及其分类和基本原理 什么是分配色谱？ 离子交换色谱的分类及应用 凝胶色谱的分离原理及分类 离子交换及疏水作用层析的原理 高效液相色谱的分离原理及应用 蛋白质分离的常用色谱方法有哪些？ 色谱技术（分配色谱） 概念：色谱技术是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相(气体或液体)，根据物质在两相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸…），达到分离的目的。 色谱分离方法的分类 色谱分离方法很多，种类有四、五十种 但常用于生物大分子分离的色谱方法，按机理分， 有以下几种： 吸附色谱利用物理吸附性能的差异，吸附力不同 分配色谱 利用两液相间分配系数的不同 离子交换色谱 利用离子交换原理，化学亲和力不同 凝胶色谱 利用分子大小或形状差异（排阻作用力的不同） 色谱法简单分类 色谱分离的基本概念 分配系数 可由Langmuir方程得出 Kd分配系数 q、c溶质在固相和液相中的浓度 阻滞因子Rf 阻滞因子是在色谱系统中溶质的移动速度和标准物（与固定相没有亲和力的流动相 Kd=0）的迁移率之比 体现某一种溶质与固定相之间的亲和力大