多重MethyLight在结直肠癌相关基因ALX4和SEPT9甲基化检测中的应用.pdfVIP

第36卷 第 5期 中山大学学报 (医学科学版) Vo1．36 No．5 2015年 9月 JOURNALOFSUNYAT—SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Sep． 2015 多重MethyLight在结直肠癌相关基因ALX4和SEPT9 甲基化检测中的应用 何 琼 ，王 冕 ，周建文 ，刘 妮 ，赖英荣 (中山大学附属第一医院 1．病理科 ，2．血管外科，广东 广州510080) 摘 要：【目的】探讨多重MethyLight方法在检测结直肠癌(CRC)外周血ALX4、SEPT9基因甲基化状态中的价值，为 CRC无创检测提供新方法。 【方法】采用不同的荧光报告基团标记ALX4、SEPT9基因甲基化探针，利用高敏感性、高特异性 的多重实时定量甲基化特异性 PCR方法(MSP，MethyLight)，同时检测ALX4、SEPT9基因在 CRC外周血 中的甲基化情况。 【结果】ALX4、SEPT9基因可分别在48％(24／50)，75％(38／50)的CRC患者外周血及 6％(3／50)，4％(2／50)的健康人 群外周血中检测到甲基化；与健康人群相比，CRC患者外周血中ALX4、SEPT9基因的甲基化水平均明显升高 (P0．001)。 【结论】利用多重MethyLight多基因联合检测技术，可高效特异地检测到CRC外周血中ALX4、SEPT9基因甲基化水平明 显升高。 关键词 ：荧光定量甲基化特异性PCR；结直肠癌；甲基化 中图分类号：R73 文献标志码：A 文章编号：1672—3554(2015)05—0657—06 DetectionofALX4andSEPT9M ethylationinHumanColorectalCancerbyMultiplex M ethyLightAssay HEQiong，WANGMian2,ZHOUJian—wed，LIUNi，LAIYing—rong (1．DepartmentofPathology，2．DepartmentofVascularSurgery，TheFirstAffiliatedHospitalofSunYat—SellUniversity，Guangzhou 510080，China) Correspondingto：LAIYing—rong；E—mail：laiyr@ 126．tom Abstract： O【bjective】Todetectthemeth~lationofALX4andSEPT9intheperipheralbloodsamplesfromCRCpatientsand nivestigatemultiplexMethyLightassaycouldbeusedforCRCdetectionasanon—invasivemodality．M【ethods】Inthepresentstudy， WeusedaPCRmnltiplexmethodthatinafastandreliablemannertodetectandquantifythemethylationlevelofA￡X4andSEPT9at thesametimeandappliedthismethodtothedetectionofCRCthroughbloodsamples．R【esults】Intheperipheralbloodplasma，the presenceofALX4，SEP19methylationwasdetectedin48％ (24／50)and75％ (38／50)ofourtestedsamplesrfomCRCpatientsand 6％ (3／50)and4％ (2／50)ofnormalcontrols，respectively．Thedifferenceinincidenceofthemethyl