酿酒酵母S.cerevisiae高密度培养条件优化研究.pdfVIP

第37卷第1期 工业微生物 V01．37№．1 2007年2月 Industrial Feb．2007 MicmbiolOgy 酿酒酵母S．fP化秒艇口g高密度培养条件优化研究 王颖， 何 宁， 李清彪， 邓 旭， 卢英华。 (厦门大学化学工程与生物工程系，厦门361005) 摘要 考察了培养基组成和培养条件对酿酒酵母＆c出nr0棚3优s鲫它说s缸P发酵的影响。以 TB培养基为初始培养基，通过正交实验设计优化培养基组成，确定了影响酵母细胞产量最主要的 因素是葡萄糖，最适培养基组成为：酪蛋白胨15 2．4d dL，酵母粉25dL，葡萄糖30彰L，II乇P04 16．34 r／rnjn。采用优化培养 L，K2唧04·3H20g／L。并确定了最佳培养条件：温度30℃，转速150 分别提高24．2％和22．0％。 关键词：酿酒酵母；培养基； 培养条件； 正交实验 近代基因技术的进步使人们可以利用微生物大 安全、生长繁殖快、代谢周期短、容易进行大规模培 量生产高价值的生物药物及其它重组蛋白。发酵产 养、菌体蛋白质丰富等优点，一直是基础和应用研究 物的多少通常与细胞密度的高低关联，因此发酵过 的主要对象，并被广泛应用于酿造、食品、医药、饲料 程的首要任务通常是研究如何尽可能地达到高的细 工业等领域[5]。近年来，世界各国均在积极采用微 胞密度，以便提高生产率、简化下游加工、减少废水 生物发酵技术开发酵母菌市场。此外，酿酒酵母还 排放量、降低培养容积、生产成本及设备投资，使目 是外源基因理想的真核生物表达系统，并与盘基网 的产物产生良好的成本效益n]。 优化培养基是一种提高细胞密度的有效方法。 培养基分复合培养基、半合成培养基和合成培养基 ence／)。 三种[2]。合成培养基成分和浓度已知且可以控制， 国内外对酿酒酵母菌培养的实验研究已有了较 常用来获得高细胞密度；复合培养基含有提取物(如 多的报道。Raj等采用合成培养基，可获得140dL 蛋白胨，酵母提取物)，营养物的成分和质量可能不 的细胞干重[6]。Park等在内置膜过滤反应器内连 同，故复合培养基进行发酵过程的重复性较差。然 续培养酿酒酵母，得到13g／(L·h)的细胞干重【．71。 而，复合培养基和半合成培基对促进产物生成是必 赵宝华等探讨了外加Ca2+、La3+对酿酒酵母生长的 要的，而且在复合培养基和半合成培基中，细胞生长 影响隋]。梅乐和等研究了酿酒酵母微囊化培养过 往往比在合成培基中快口]。为使细胞生长达到高密 程旧]。此外，也有不少研究集中在基因工程和固定 度，有必要设计一种含必需成分的平衡性营养培养 化技术于酿酒酵母生产中的应用n¨12J。本文以TB 基，以维持细胞生长，同时避免生长的抑制。 培养基(一种培养大肠杆菌的简单复合培养基)为基 酿酒酵母(＆c如口加m煳cP陀口is缸8)作为人类础，考察了培养基成分和浓度，以及培养条件等对酿 利用最早的微生物，其营养成分十分丰富，含有菌体 酒酵母发酵培养的影响，并利用正交实验对培养基 蛋白质、多种氨基酸、维生素、脂肪、食物纤维、矿物 进行了优化，开发出了一个适合高密度培养酿酒酵 元素、微量元素及生理活性物质等¨]。由于其具有 母菌的简单复合培养基。 基金项目：厦门市科技计划资助项目(编号：3502220031079)； 作者简介