tcdca与糖质激素受体的相互作用及其对活化蛋白-1的影响.pdf

LILIllhlllltlhllll 4lllLIqlllhLIqLIIIqqlLIlllLIII Y2600759 本论文由 国家自然科学基金项目 (No资助 Thisworkwas frI grants[rom supportedbygrants TheNationalScienceFoundationofChina (No 摘 要 汁中，是动物胆汁酸的有效成分之一，具有显著的抗炎及免疫调节作用。TCDCA 在结构上具有环戊烷多氢菲的基本母核，与甾体激素具有相似的化学结构。为了 更加深入揭示TCDCA的抗炎免疫调节作用机制，本研究以佐剂性关节炎 (Adjuvant receptor，GR)的相互作用及其对转录因子活化蛋白．1(Activatorprotein．1，AP．1) 和从大鼠FLS细胞凋亡的影响。具体研究内容如下： (1)TCDCA与GR的相互作用 告基因法检测GR的激活情况：采用荧光显微镜追踪GR核移位。研究结果显示， TCDCA能够与GR732位上的亮氨酸以氢键发生相互作用，其结合吉布斯自由 MTCDCA 能变为．4．51kcal／mol，解离常数Kd=498．39州；与对照组相比，1×10 能够显著激活GR并发生核移位。 (2)TCDCA对AP．1及细胞间粘附分子．1表达与活性的影响 采用western M 果显示，l×10-6一l×10’4 蛋白表达量及AP．1DNA结合活性。 adhesion X ICAM．1蛋白表达量。研究结果显示，l×10石～1104mol／L TCDCA均能够显著 抑制ICAM-I mRNA和蛋白的表达(p，o．05)，且该抑制作用可被GR阻断剂米 非司酮(RU486)所拮抗。 (3)TCDCA对AA大鼠FLS细胞凋亡的影响 采用流式细胞术检测了TCDCA对AA大鼠FLS细胞凋亡率的影响；采用 Caspase．3、Casp髂e．8活性的影响。结果显示，TCDCA(400p．g／mL)与对照组 相比，可极显著增加FLS凋亡的百分率(PO．01)；TCDCA(400 lag／mL)与对 照组相比，可显著提高caspase．8基因表达水平(尸0．05)：TCDCA(400l-tg／mL) p．g／mL) 可极显著提高Caspase．3活性(PO．01)。 本研究的主要结论如下： (1)TCDCA能够与GR结合并激活GR； DNA 结合活性： 因表达及其活性，并促进FLS细胞凋亡。 (5)TCDCA的抗炎免疫调节作用与其影响糖皮质激素受体介导的基因组 学信号通路有关。 关键词：牛磺鹅去氧胆酸；成纤维样滑膜细胞：糖皮