α-突触核蛋白阿维菌素致王鸽脑神经细胞自噬中的作用研究.pdf

目录 IIIIIIIIII IIIIIIIIIIIIIIII 目 录 摘要……………………………………………………………………………………………………………………I 英文摘要……………………………………………………………………………………IlI 1引言………………………………………………………………………………………．I 1．1阿维菌素概况……………………………………………………………………．．1 1。2阿维菌素与毒理学………………………………………………………………一1 1．2．1阿维菌素药理作用机制………………………………………………………．1 1．2．2阿维菌素毒性…………………………………………………………………l 1．3似突触核蛋白概况…………………………………………………………………2 1．3．1Ⅱ一突触核蛋白…………………………………………………………………．2 1．3．2旺一突触核蛋白的功能……………………………………………………………3 1．4自噬…………………………………………………………………………………………………………．3 1．4．1自噬的检测方法………………………………………………………………4 1．4．2白噬在毒理学研究中的研究进展……………………………………………．5 1．5RNA干扰技术……………………………………………………………………一5 1．6试验的目的与意义………………………………………………………………一5 2材料与方法………………………………………………………………………………．7 2．1主要仪器和试剂…………………………………………………………………一7 2．1．1主要的仪器……………………………………………………………………7 2．1．2主要的试剂……………………………………………………………………7 2．1．3主要试剂的配制………………………………………………………………8 2．2实验材料…………………………………………………………………………一9 2．2．1鸽胚脑神经细胞的培养及处理………………………………………………．9 2．2．2鸽胚脑神经细胞鉴定………………………………………………………．．10 2．2．3王鸽脑神经细胞Ⅱ一突触核蛋白基因的干扰…………………………………．10 1 2．2．4鸽胚脑神经细胞的处理………………………………………………………l 1 2．3王鸽Dynein多克隆抗体的制备…………………………………………………l 2．3．I引物设计与合成………………………………………………………………11 2．3．2扩增目的基因………………………………………………………………．．11 2．3．3基因的克隆、鉴定及序列测定与分析………………………………………11 2．3．4王鸽Dynein基因重组表达载体的构建与鉴定………………………………12 2．3．5王鸽Dynein基因在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定………………………13 2．3．6抗王鸽Dynein多克隆抗体的制备和鉴定…………………………………．．14 2．4检测项目与方法…………………………………………………………………15 万方数据 东北农业大学农学硕I：学位论文 2．4．1王鸽脑神经细胞超微结构……………………………………………………15 2．4．2王鸽脑神经细胞中自噬相关基因核酸水平的检测…………………………．15 2．4．3王鸽LC3、Beelin