家蚕elav基的克隆分析和时空表达研究.pdfVIP

家蚕点抬y基因的克隆分析和时空表达研究 中文摘要 家蚕f／a矿基因的克隆分析和时空表达研究 中文摘要 胚胎致死异常视觉蜀删基因，是果蝇神经系统发育和功能异常的致死基因。根 据果蝇ELAv蛋白质的氨基酸序列，利用家蚕EST数据库，电子克隆出一条肋v基 因的同源基因砌，．目卯。进一步以家蚕大造品种L5．3d的丝腺RNA为模板，盯PcR 方法得到砌zZ鲫基因的cDNA序列，其0RF框为807bp，碱基序列与预测序列一 致。通过比较分析NcBI数据库中家蚕的全基因组数据，获得了家蚕砌．目删的基因 组DNA序列，该序列仅包括一个外显子而没有内含子。推测的Bm．彤西基因翻译蛋 白质有268个氨基酸，蛋白质结构中有3个RRM基序，属于IutMRNA结合蛋白家 族。 西纷甚z嚣基因的融合蛋白，为研究砌z堀伽功能奠定了基础。 为了探讨锄．觑删基因的功能，调查了西加肌卯基因的时空表达。以一3基因为内标， h、30 根据构建的历”．可口’，基因优化半定量RT-PCR方法，调查了家蚕产下后O．5h及活 d和6d、吐丝ld、蛹期3d和6d时期的卵巢和脂肪体；5龄3d和6d、 化时期的卵；5龄3 吐丝ld时期的中肠、丝腺和造血器官组织占而．懿卵基因的差异性表达。结果显示， 家蚕砌棚口v基因在幼虫、蛹期的表达没有时期、组织显著差异性，而在活化卵中没 有表达。推测家蚕召研zh，基因在卵活化后的胚胎发育期表达可能会导致出现非正常 视觉而致死。 关键词：家蚕；致死基因；砌也Z胛；克隆；时空表达 家蚕fhr基因的克隆分析和时空表达研究 英文摘要 of on and aLethal—likeGene StlldyCloningA皿alysis andIts 7Iemporal．spacialExpressiOn ABSTRACT a lelllalabnonnalvis岫l is l甜lal Emb搿ollic g钮e(踟0 gc∞in西删妇讲dch illduccst11e fI】nctiondbn咖allcloIled mlraI$st锄todevel叩alld y．We a蜀w囊伽gene bioinfb珊atics缸d ontlle of success矗mythrough biologicalexp嘶ment，basedsequ锄ce ELAV锄ioacjdof EsTdatab嗷．111e D，卿叻纸嬲d删lizingt11e历m6j搿m洲0 砌堰Z册cDNAw孙obtailled byRT_PcR(R删e璐eTraIls嘶ptase)metllod丘Dmsilkgland 5m a oftlleinstar of踟‘t11e 1anr犯ofa心纨O删e啦．西行一踟，ishomologousgcIle Rcad 807in cIlcoded llle 0I球(OpenF舢e)i|lc