小鼠4、8-细期胚胎单卵裂球染色体标本制备的研究.pdfVIP

J，鼠4，8．细胞期胚胎单卵裂球染色体标本制备的研究一一摘要 小鼠4、8一细胞期胚胎单辱丹裂球染色体标本制备的研究 摘要 染色体是生物遗传的物质载体，在生物的世代相传过程中表现出高度的 稳定性和物种特异性。通过染色体分析，可为研究物种的起源进化、品种的 形成和基因的定位提供细胞遗传学方面的基本资料。本实验以昆明小鼠4、 8．细胞期胚胎单卵裂球为研究对象，以CzB培养液为基础培养液，采用空气 干燥法制备单卵裂球的染色体标本。实验中分别添加不同浓度的两种纺锤体 阻断剂——秋水仙素和长春花碱进行不同阻断培养时间的实验以确定阻断剂 的最佳处理浓度和时间，并以不同低渗液对胚胎进行低渗处理以确定最佳的 低渗液种类，从而获得了理想的实验参数，进一步对得到的中期分裂相进行 了分级评定。实验结果如下： 1、在确定秋水仙素不同处理浓度和时间对小鼠4．细胞期胚胎单卵裂球 中期分裂相数影响的实验中，经统计分析，阻断培养2小时组中0．6雌，r11l浓 度组与其他三组差异显著(0．2陷，m】组、O．4p咖Ill组和O．8p咖l组)；阻断 培养4小时组中O．4p咖l浓度组与其他三组差异显著；阻断培养6小时组中 O．6“咖l浓度组与其他三组差异显著；阻断培养8小时组中O．4岭／rnJ浓度组 与其他三组差异显著(Po．05)。根据实验的实际情况，适宜制备小鼠4．细 胞期胚胎单卵裂球染色体标本的秋水仙素的处理浓度和时间是0．6肛g枷和6 小时。 2、在确定秋水仙素不同处理浓度和时间对小鼠8．细胞期胚胎单卵裂球 中期分裂相数影响的实验中，经统计分析，阻断培养2小时组中四个浓度组 差异均不显著：阻断培养4小时组中O．2肛∥11ll浓度组与其他三组差异显著； 阻断培养6小时组中四个浓度组差异均不显著；阻断培养8小时组中0．4p咖l 浓度组与其他三组差异显著(P0．05)。根据实验的实际情况，适宜制备小 鼠8一细胞期胚胎单卵裂球染色体标本的秋水仙素的处理浓度和时间是 卜鼠4．8一细胞期胚胎单卵裂球染色体标本制备的研完一一摘要 0．2}lg／ml和6小时。 3、在确定长春花碱不同处理浓度和时间对小鼠4．细胞期胚胎单卵裂球 中期分裂相数影响的实验中，经统计分析，阻断培养O．1¨g／ml浓度组中10 小时组与其他三组差异显著(4小时组、6小时组和8小时组)；阻断培养 O．3“∥ml浓度组中8小时组和10小时组问差异不显著，但与其他两组差异显 著；阻断培养O。5p咖l浓度组中lO小时组与6小时组差异不显著，而与其 他两组差异显著：阻断培养0．7¨g／ml浓度组中8小时组与其他三组差异显著 (P0．05)。根据实验的实际情况，适宜制备小鼠4．细胞期胚胎单卵裂球染 色体标本的长春花碱的处理浓度和时间是O．!p咖l和8小时。 4、在确定长春花碱不同处理浓度和时间对小鼠8．细胞期胚胎单卵裂球 中期分裂相数影响的实验中，经统计分析，阻断培养O．1腭，rnl浓度组中10 小时组与其他三组差异显著：阻断培养O．3烬／rnl浓度组中8小时组和lO小 时组间差异不显著，但与其他两组差异显著；阻断培养0．5¨劝fIll浓度组中10 小时组与其他三组差异显著；阻断培养O．7pg，ml浓度组中10小时组与其他 三组差异显著(Po．05)。根据实验的实际情况，适宜制备小鼠8一细胞期胚 胎单卵裂球染色体标本的长春花碱的处理浓度和时间是O．1}L咖l和10小时。 5、在确定不同种类低渗液处理对小鼠4、8．细胞期胚胎单卵裂球中期分 裂相数影响的实验中，经统计分析，O．45％氯化钠低渗液组与其他两组(O，5％ 柠檬酸钠和O．35％氯化钾)差异显著(P0．05)。低渗液选用0：45％氯化钠时， 低渗效果优于选用O．5％柠檬酸钠和O．35％氯化钾的。 6、在利用最佳参数制备小鼠4一细胞期胚胎单卵裂球染色体标本时，经 统计分析，两种阻断剂的作用效果差异不显著：而在制备小鼠8．细胞期胚胎 单卵裂球染色体时阻断剂选用长春花碱的效果优于秋水仙素的(Po．05)。 7、秋水仙素组和长春花碱组小鼠4、8．细胞胚胎单卵裂球染色体标本制 “ 备质量分别为：2．5、2．7、2．4、1．9。 关键词：小鼠，单卵裂球，染色体制备，秋水仙素，长春花碱 onChromosomeof Blastomere