猪圆环病毒2型除nls orf2基因的原核表达和琼脂扩散实验检测方法的建立.pdfVIP

摘要 摘 要 圆环病毒(Porcine 状、负链、无囊膜的DNA病毒，是己知的最小动物病毒之一，人小约17～-20nm，呈二十面体对称。 无致病性，PCV2具有致病性，是断乳仔猪多系统衰竭综合征(Postweaningmultisystemicwasting 1个读码框， 其中ORF2编码PCV2的主要结构蛋白Cap蛋白，该蛋白具有较强的免疫原性，核苷酸序列同源性 其能成为在分子水平上诊断PCV2的理想抗原。PCV2 N端41个氨基酸与Cap蛋白的核内定位密 切相关，其中12～18位及34--一41位的氨基酸对Cap蛋白的核内定位起着决定性作用。 IIH／nd 过BamH 诱导表达、SDS．PAGE鉴定，表明去核定位信号的Cap蛋白可以大鼍表达，表达量I吁全菌体的55．9％。 Western blot、ELISA鉴定蛋白活性，结果表明：该蛋白具有良好的抗原活性。 本实验中利用原核表达的重组蛋白建立了琼脂扩散实验的检测方法。根据可溶性抗原与相应抗 体混合，在电解质