苏云金杆菌vi基因的鉴定与克隆.pdfVIP

Y1307066 摘要 本研究利用温度筛选法，对采自河北、贵州等部分地区的202份土壤样品进行分 离，得至1J73株野生型苏云金芽孢杆菌(Bacillus 行PCR鉴定，结果显示，63株能够获得预期大小的PCR产物，分布率约为36．8％。 极其保守，但是杀虫活性差异较大，其中菌株TF9和Btl6分别对甜菜夜蛾表现高度和 96．70％~99．1l％。 M15，SDS．PAGE和WesternBlot分析表明，IPTG p30vip一16和p30vip．TF9，并转化层coli 4．423I-tg／mL，对甜菜夜蛾和棉铃虫的抑制作用不明显。 Blot分析验证了这些基因在菌 株含有viplA／vip2A基因，分布率为11．69％。Western 系。 and Identification fromBacillus Cloningof却Genes thuringiensis Master candidate：ShcnJianru GuoWei sllpa俯：Professor InsectandPest Major：A鲥cIlltIl|僵ll Control Abstract the Bacillus isolateswore method，73 Usingtemperaturescreening thuringiensis obtainedfrom202soil collectedfromsomelocationsofHebeiandGuizhou samples examinationandSDS—PAGEresultindicated ofthem provinces．Themicroscope thatmost 130kDaand60kDainsecticidal expressed crystal proteins． Withtheuniversal of oftheseisolates primers SvipS／Svip3，thevip3A—genetypes wore identified chainreaction--restriction byPCR—RFLP(polymerase fragmentlength of PCR woreidentifiedfrom63isolates polymorphism)method．1．45kbexpectedproducts andthedistributionratewas resultsshowedthatthreebandsof881 36．8％，RFLP