水稻badh和amdc基因的遗传转化及其耐盐性研究.pdfVIP

水稻BADH和SAMDC基嗣的遗传转化及其耐盐性研究 摘 要 ±地盐渍化是影响农业生产和生态环境的严重问舔，是导致占世界三分之一灌溉区的广 大盐诫地水稻减产的重要原因。我国受盐侵害的稻田约占栽培嚣积的五分之一，并且有日盏 扩大和加剧的趋势，造成的产擅损失已难以估算。另外耕地面积的减少和淡水资源的不足将 迫使人们开发和利用大面积的盐碱地和沿海的潍涂地带。因此植物耐盐的机理的研究和埘数 植物静培育将成为相关学科研究的热点。 为了缓减盐对穗物细胞的损伤，许多植物细胞都积累一些称为渗透调节荆的小分子有枫 物如甜菜碱，多胺，甘露碱。如果将编码有关这些渗透调节剂的基因转入水稻，能够提高转 基因水稻的耐盐性。本文拟通过农扦菌介导法和基因枪法将BADH基因、SAMDC基因导入 ^ 水稻常规品种中，得到转基因永稻植株，班提高水稻的耐盐牲口l主要结果如下： ＼ 1． 本实验对5个水稻品种遴行了基因转化，受体搴|料为来源于幼胚和成熟胚的胚性愈伤组 织，共褥到3个品神、计263株转基因植株。不同基因型阔转化效率存在较大差异，尤 其是较易转化品种台北309与较难转化品种752的转化效率相差达18倍；澍基因枪法而 言，随着质粒DNA艮度增加，其转化效率呈现下降的趋势。此外，本文还对基因枪法和 农秆菌介导法两种转仡方法进行了比较。 2． 对Kan和G418的筛选效果进覃亍了}E较，Kan对于水稻的愈伤组织的生长抑制作用并不 明显，丽100mg／L的G418基本能抑制水稻愈伤的生长。所以对于水稻转基融来说，如 也能完金抑制水稻愈伤生长。 3+ 应用PCR扩增方法可馘初步获得萄的基因整合到转基因楦株基因组中的分予证据。转 植株基因组中。不论是用基因枪法还廷农杆菌介署法获得的转基因檀株，均表现为多位 点插入，拷贞数一般在5个跣上。对来源于同一壳隧的几棵转基因植探的Southern分析 表明，其整合方式完全一致。 4。 BADH鹃活性分析表明：转BADH基爵水稻植株都检测到了BADH酶活性，嚣对照没 有检测刘，僵不同转基因个体闲BADH酶溪性差异很大。经靛胁迫的转基因水稻BADH i 酶活性显著提高，其活性值在250U--300U之间，株系间差异很小。 5． 转基因植株在0．5％的盐池中能正常生长，而对照的生长受到抑制，两周后整株都发黄并 在三周后死亡。不同转BADH基因水稻株系的耐盐能力相近，可能原因是盐胁迫后水稻 BADH酶活性相近，这也说明BADH酶活’眭与耐盐能力正相关。转基因水稻植株所结种 子的耐盐能力也显著提高。在0．5％NaCI或0．8％NaCI胁迫下，转基因种子的根系和茎 叶生长情况大大优于未转基因的对照。 6 对几个转基因株系的遗传分析表明，转BADH基因植株TI群体中BADH基因能够按孟／ ＼／ 德尔法则在转基因后代中分离，尽管外源基因以多拷贝的形式整合到水稻植株基因组中。y ， 关键词：查塑丝旦旦；趣SA朋D(≯因遗传转化耐盐笋 √ V V。 V on Studiesthe transformationof genetic BADHandSAMDC their and salttolerancein rice genes Abstract