沙海蜇ace抑肽制备及预防高血压效果与机理研究.pdfVIP

谨以此论文献给给我帮助和温暖的人们！ 万方数据 万方数据 万方数据 沙海蜇ACE 抑制肽制备及预防高血压效果与机理研究 摘 要 我国沙海蜇资源丰富，近年来甚至频繁出现爆发，但由于目前沙海蜇的加工 方式比较单一，使沙海蜇资源没有得到充分利用。本文试图建立一种新的沙海蜇 加工方法，即将其酶解、脱腥、脱盐、喷雾干燥后制成一种新的食源性ACE 抑 制肽，并对沙海蜇ACE 抑制肽预防高血压的效果和机理进行研究。 首先，对用碱性蛋白酶酶解新鲜沙海蜇制备 ACE 抑制肽的酶解条件进行了 研究。先后以水解度（DH ）和ACE 抑制率为指标，经单因素实验和正交实验得 到最佳的酶解条件为：酶解温度50℃、加酶量5%、酶解起始pH9.5 。采用改进 的高效液相色谱法测定ACE 抑制率，发现新鲜沙海蜇在以上条件下酶解 7h 时 所得多肽的ACE 抑制率最大。所得ACE 抑制肽脱盐冻干后，测定在0.5mg/mL 浓度时 ACE 抑制率为54.53% 。最后，通过排阻色谱法测得其相对平均分子量约 为500Da 。 然后，对沙海蜇ACE 抑制肽酶解液进一步加工制备成ACE 抑制肽的工艺条 件进行了研究。该工艺条件主要包括脱腥、脱盐和喷雾干燥三个过程，并对制得 的沙海蜇 ACE 抑制肽的成分进行了分析。以蛋白质损失率(%)和三甲胺含量 （mg/L ）为指标，经单因素实验和正交实验得到最佳的脱腥条件为：活性炭添 加量（w/v ，g/mL ）0.2%，脱腥温度20 ℃、脱腥时间40mim 。脱腥后的沙海蜇酶 解液经减压浓缩、0.45µm 滤膜抽滤，200 纳滤膜脱盐，喷雾干燥（进风温度 165-175℃，出风温度85-95℃）后得到白色沙海蜇ACE 抑制肽粉，并测得其蛋 白质含量为81.50 ±0.42%、水分含量为6.23 ±0.24%、盐分含量为2.88 ±0.11%、 脂肪含量为 0.21 ±0.03%、糖分含量为 5.97 ±0.21%，为低脂低糖的健康功能性 食品。 最后，研究了所得沙海蜇ACE 抑制肽对L-NAME 致高血压发生的预防作用 和机理。80 只大鼠随机分成5 组，对照组灌胃蒸馏水（0.5mL/d ），L-NAME 组 灌胃L-NAME （20mg/Kg.bw ），低、高剂量沙海蜇ACE 抑制肽组（简称低、高 剂量组）灌胃 L-NAME （20mg/Kg.bw ）的同时分别灌胃 100mg/Kg.bw 和 500mg/Kg.bw 的沙海蜇ACE 抑制肽，卡托普利组灌胃L-NAME （20mg/Kg.bw ） 的同时灌胃10mg/Kg.bw 的卡托普利。灌胃前和灌胃1、2 、3 周时测量大鼠体重 1 万方数据 和血压。灌胃1 周后，5 组大鼠血压差异明显。为研究大鼠血压和血浆中血压相 关因子的关系，5 组大鼠各处死一半（8 只），测定血浆中ACE 、肾素（PRA ）、 NO 、NO 合成酶(NOS)、Ang Ⅱ的活性或含量。灌胃3 周后，处死剩余大鼠，测 定大鼠血浆和尿液中ACE 、NO 、NO 合成酶(NOS)及尿微量蛋白 （MAU/ALB ） 的含量，并计算心脏和肾脏指数。结果发现，灌胃L-NAME 可使大鼠血浆中NO 和 NOS 含量降低，同时激活 RAAS ，并导致血压的显著升高。但可能是由于 L-NAME 的灌胃剂量不够高，灌胃L-NAME 后大鼠血压先上升然后下降并逐渐 趋于正常水平。沙海蜇 ACE 抑制肽在 L-NAME 致高血压模型中可以起到抑制 ACE 活性、Ang Ⅱ含量上升，促进L-NAME 导致的高血